人细胞角蛋白17(CK17)ELISA
人细胞角蛋白17(CK17)ELISA 是一种用于检测人体样本中细胞角蛋白 17 含量的酶联免疫吸附测定技术，在医学研究和临床诊断中具有重要意义。
细胞角蛋白 17 属于中间丝蛋白家族，主要在复层上皮及一些恶性肿瘤细胞中表达。通过检测其含量，可辅助疾病的诊断与病情评估。人 CK17 ELISA 试剂盒一般采用双抗体夹心法原理。试剂盒中包含已包被抗人 CK17 抗体的微孔板，当加入待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清等）时，样本中的 CK17 会与固相抗体特异性结合。之后加入酶标抗人 CK17 抗体，它会与已结合在固相抗体上的 CK17 结合，形成 “固相抗体 - CK17 - 酶标抗体" 免疫复合物。经过彻di洗涤，去除未结合的物质，此时加入酶底物显色剂。在酶的催化作用下，底物发生显色反应，颜色的深浅与样本中 CK17 的含量成正比。最后，使用酶标仪在特定波长（通常为 450nm）下测定吸光度（OD 值），通过与预先绘制的标准曲线对比，就能准确计算出样本中 CK17 的浓度。
以常见的试剂盒操作为例，首先需准备好样本，按照规定进行采集与预处理，保证样本的质量。同时，将试剂盒从冷藏环境取出，平衡至室温。在微孔板中准确加入标准品，设置不同浓度梯度，如 0、10、20、40、80、160 pg/mL 等，用于绘制标准曲线。接着，将处理好的待测样本加入对应的孔中。加入样本后，轻轻振荡混匀，用封板膜封板，置于 37℃恒温培养箱中孵育一段时间，常见为 30 分钟。孵育结束后，弃去孔内液体，用洗涤缓冲液洗涤微孔板数次，每次浸泡一定时间（如 30 秒），确保彻di去除未结合物质，然后拍干。随后加入酶标工作液，再次孵育并洗涤。之后依次加入显色剂 A 和显色剂 B，轻轻振荡混匀，在 37℃避光环境下显色，显色时间一般为 15 分钟左右。当显色达到预期效果后，加入终止液终止反应，此时溶液颜色由蓝色变为黄色。在加入终止液后的 15 分钟内，使用酶标仪测定各孔的 OD 值。
人 CK17 ELISA 检测具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点，能够准确检测出低含量的 CK17，为疾病的早期诊断提供依据。在临床应用方面，可用于某些上皮源性肿瘤（如乳腺癌、肺癌等）的辅助诊断、病情监测以及预后评估，帮助医生更好地制定治疗方案和判断患者的康复情况。
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