小鼠肺部活化调节趋化因子试剂盒：精准检测的得力工具
小鼠肺部活化调节趋化因子试剂盒，在科研与医学研究领域发挥着关键作用，为深入探究相关生理病理机制提供有力支持。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），能够精准测定标本中小鼠肺部活化调节趋化因子（PARC/CCL18）的水平。
试剂盒的核心原理基于抗原抗体的特异性结合。首先，将纯化的小鼠肺部活化调节趋化因子（PARC/CCL18）抗体包被于微孔板，制成固相抗体。当往包被单抗的微孔中依次加入标本、标准品以及 HRP 标记的检测抗体后，若标本中存在肺部活化调节趋化因子（PARC/CCL18），其会先与固相抗体结合，进而再与 HRP 标记的抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。经过彻di洗涤去除未结合物质后，加入底物 TMB。在 HRP 酶的催化下，TMB 转化成蓝色，并在酸的作用下最终转变为黄色。颜色的深浅与样品中的肺部活化调节趋化因子（PARC/CCL18）含量呈正相关，通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），再依据标准曲线即可精确计算出样品中小鼠肺部活化调节趋化因子（PARC/CCL18）的浓度。
在样本处理方面，该试剂盒具有广泛的适用性。血清样本，需将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，随后 1000×g 离心 20 分钟，取上清备用，上清也可置于 - 20℃或 - 80℃保存，但要避免反复冻融；血浆样本，以 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，在采集后的 30 分钟内于 2 - 8℃、1000×g 离心 15 分钟，取上清用于检测，同样需注意避免反复冻融；组织匀浆样本，先用预冷的 PBS (0.01M, pH = 7.4) 冲洗组织以去除残留血液，称重后剪碎，按 1:9 的重量体积比（如 1g 组织对应 9mL PBS，可根据实验需求适当调整）加入含蛋白酶抑制剂的 PBS 于玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨，还可通过超声破碎或反复冻融进一步裂解细胞，最后 5000×g 离心 5 - 10 分钟，取上清检测；细胞培养物上清或其它生物标本，则直接 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测，也可低温保存并避免反复冻融。
操作该试剂盒时，从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封放回 4℃。除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。之后弃去液体，在吸水纸上拍干，每孔加满 350μL 洗涤液，静置 1min 后甩去洗涤液并拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。接着每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min，再加入 50μL 终止液，15min 内于 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
小鼠肺部活化调节趋化因子（PARC/CCL18）在免疫反应中扮演重要角色，能吸引淋巴细胞参与 B 细胞迁移到 B 细胞滤泡淋巴结，对初始 T 淋巴细胞、CD4 + 和 CD8 + T 细胞也具有趋化活性。该试剂盒凭借其高灵敏度、特异性强、操作相对简便、检测快速以及结果稳定等优势，可用于定量检测体液中抗原成分，在生化领域应用广泛，助力科研人员深入开展相关研究，推动相关领域的知识拓展与技术进步。
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