N1大鼠骨髓源神经嵴祖细胞系
N1大鼠骨髓源神经嵴祖细胞系系作为源自大鼠骨髓的神经嵴谱系祖细胞模型,因保留神经嵴细胞te有的多向分化潜能与迁移特性,在神经发育调控、神经损伤修复及神经嵴相关疾病研究中具有du特jia值,成为探究神经嵴细胞生物学特性及应用的重要实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠骨髓基质细胞,经神经诱导分化和克隆筛选获得。细胞形态呈典型的神经前体细胞样,多为纺锤形或 bipolar 形,胞体大小均匀(长度约 40-60μm,宽度约 10-15μm),胞质呈弱嗜碱性,可见丰富的微管和神经丝,约 20% 细胞可见细长的神经突样突起(长度可达胞体直径的 3-5 倍),细胞核呈椭圆形,位于细胞中央,核仁清晰。生长方式为贴壁生长,呈放射状或网状排列,接触抑制较弱,传代后 24 小时贴壁率达 93%。核心参数符合神经嵴祖细胞特征:倍增时间约 48 小时,连续传代 20 次后仍保持稳定的生物学特性;表面标志物表达du特,nestin 阳性率达 96%,神经嵴特异性标志物 p75NTR 阳性率 95%,SOX10 阳性率 93%,而造血细胞标志物 CD45 阳性率低于 2%;具有正常的二倍体核型(染色体数 42 条),无染色体畸变;多向分化潜能显著,在神经元诱导培养基中培养 10 天后,β- 微管蛋白 Ⅲ(Tuj1)阳性率达 82%,突触素(synaptophysin)表达量增加 7 倍;在施万细胞诱导条件下,S100β 阳性率达 78%,髓鞘碱性蛋白(MBP)分泌量达 35ng/mL;在平滑肌细胞诱导环境中,α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性率达 75%;迁移能力突出,Transwell 实验中 24 小时迁移率达 65%,受神经生长因子(NGF)诱导后迁移率提升至 85%;无微生物污染,细胞纯度达 96%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在神经发育研究中,N1 细胞经视huang酸处理 7 天后,神经嵴分化调控基因 SOX9 表达量增加 5.2 倍,神经突平均长度从 45μm 延长至 180μm,可模拟神经嵴细胞向神经元分化的早期过程,为解析神经嵴细胞命运决定机制提供理想模型。
神经损伤修复研究方面,该细胞与损伤脊髓组织共培养时,可向损伤区域迁移,迁移距离达 1.2mm,促进神经再生相关基因 GAP-43 表达量增加 4.8 倍,髓鞘修复率达 55%;经脑源性神经营养因子(BDNF)预处理后,细胞存活率提升 40%,神经突分支数增加 2.3 倍,可模拟神经嵴祖细胞在神经损伤后的修复作用,适用于探究周围神经再生机制。
神经退行性疾病研究领域,该细胞经 6 - 羟基多巴胺(6-OHDA)处理后,多巴胺能神经元标志物 TH 阳性率下降 60%,活性氧水平提升 75%,凋亡率达 42%,能很好地模拟帕金森病模型中神经嵴来源神经元的损伤过程,为探究神经嵴相关神经元退变机制提供实验基础。此外,该细胞与神经胶质细胞共培养时,星形胶质细胞的神经营养因子分泌量增加 3 倍,可用于探究神经嵴祖细胞与胶质细胞的相互作用在神经保护中的机制。
培养与保存规范:推荐使用含 20% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,添加 20ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10ng/mL 表皮生长因子(EGF)及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每天更换,以维持细胞的增殖活性和分化潜能。传代时,用 PBS 冲洗细胞 2 次,加入专用细胞解离液,37℃孵育 5-7 分钟,待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落,传代比例为 1:2-1:3,每 3 天传代一次,避免细胞过度密集导致分化。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,细胞浓度调整为 4×10⁶个 /ml,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)后,复苏存活率达 85% 以上,2 代内可恢复正常的生长和分化能力。运输采用干冰冷冻运输或专用细胞运输培养基,收到细胞后需静置培养 12 小时,更换培养基后观察细胞形态,确认神经突生长正常且无异常漂浮物后进行实验。该细胞系仅限科研使用,操作时需避免频繁更换诱导因子浓度,以防影响细胞分化方向稳定性。
N1 大鼠骨髓源神经嵴祖细胞系以其稳定的神经嵴细胞特性、多样的分化潜能及显著的神经修复能力,在神经发育生物学、再生医学及神经疾病研究中发挥着重要作用,为揭示神经嵴细胞的生物学功能和开发神经损伤治疗策略提供了可靠的细胞模型。
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