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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1339BHK/slam/v仓鼠肾细胞系

BHK/slam/v仓鼠肾细胞系
产品型号:BY-1339
简要描述:

BHK/slam/v仓鼠肾细胞系,成纤维样,贴壁生长,稳定表达 SLAM 受体,对多种病毒敏感,适用于病毒感染机制研究、疫苗开发及抗病du药物筛选,应用前景广泛。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

BHK/slam/v仓鼠肾细胞系
BHK/slam/v仓鼠肾细胞系是基于 BHK-21 细胞经基因工程改造构建的稳定表达株,通过导入 SLAM(信号淋巴细胞活化分子)受体基因获得特异性病毒易感能力,因受体表达稳定、病毒复制效率高,成为副黏病毒科等病毒研究及疫苗开发的专属模型。其保留 BHK 细胞增殖迅速、易培养的核心优势,同时赋予了 SLAM 介导的病毒感染特异性,为解析病毒入侵机制及抗病du药物筛选提供了精准工具。
一、细胞来源与基本特性
  • 来源与构建:该细胞系以 BHK-21(幼仓鼠肾细胞)为亲本,通过慢病毒载体介导将犬源或人源 SLAM 基因导入细胞基因组,经 G418 抗性筛选及单克隆纯化获得稳定株,“slam/v" 标识其表达的 SLAM 受体及病毒敏感性特征。构建过程中采用 EF1α 启动子驱动表达,结合 kozak 序列优化翻译起始效率,使 SLAM 受体膜定位率达 90% 以上,显著提升病毒结合效率。

  • 形态与增殖:体外培养呈典型成纤维样形态,贴壁生长,细胞呈长梭形,排列疏松,边界清晰,核质比适中,形态与亲本 BHK-21 细胞一致。在 37℃、5% CO₂条件下,增殖速度快,传代周期约 18-24 小时,可适应含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,传代 50 次以上仍能维持 SLAM 高表达(表达量为亲本细胞的 30-40 倍),病毒敏感性无明显衰减,优于瞬时转染系统。

  • 表达特征:SLAM 为 I 型跨膜糖蛋白,膜表达量达(2.5-3.0)×10⁵分子 / 细胞(流式细胞术检测),对副黏病毒科病毒(如犬瘟热病毒、麻疹病毒)的亲和力高(解离常数 Kd≈3×10⁻⁹ M)。其胞外域可特异性结合病毒血凝素蛋白,介导病毒包膜与细胞膜融合,显著提升病毒入侵效率(感染滴度比亲本 BHK-21 细胞高 10-100 倍),且支持病毒完整复制周期(从吸附到释放约 48-72 小时)。

二、核心应用领域
  1. SLAM 介导的病毒感染机制研究

该细胞系是解析副黏病毒科病毒入侵机制的理想模型。通过共聚焦显微镜可观察 SLAM 与病毒蛋白的共定位动态(感染后 1 小时共定位率达 60% 以上),结合 pull-down 实验筛选病毒 - 受体相互作用的关键氨基酸位点;或通过 CRISPR/Cas9 敲除 SLAM 基因,对比分析病毒滴度变化(下降 90% 以上),验证其在病毒入侵中的必要性。例如,在研究犬瘟热病毒变异株的宿主适应性时,其能清晰呈现 SLAM 受体多态性对病毒结合效率的影响,为病毒跨物种传播机制提供实验依据。
  1. 病毒疫苗开发与生产

在疫苗产业化中,该细胞系因病毒复制效率高,成为多种兽用疫苗的优选生产基质。例如,在犬瘟热疫苗生产中,其支持病毒高效增殖(病毒滴度可达 10⁷ TCID₅₀/mL),且培养条件简单,可通过微载体悬浮培养实现规模化生产,显著降低疫苗成本;在麻疹病毒减毒株筛选中,其能稳定区分减毒株与野毒株的复制差异(减毒株滴度低 2-3 个数量级),为疫苗安全性评估提供量化标准。
  1. 抗病du药物筛选与评估

该细胞系可用于筛选靶向 SLAM - 病毒相互作用的抗病du药物。通过检测候选药物对 SLAM 与病毒蛋白结合的抑制率(ELISA 法)及病毒感染后的细胞病变抑制效果,评估药物活性;其单一表达 SLAM 受体的特性,可排除其他病毒受体的干扰,精准反映药物的特异性。例如,在筛选犬瘟热病毒抑制剂时,可通过空斑减数实验计算药物的 IC₅₀,结果重复性高(变异系数<6%),为药物开发提供可靠数据。
三、优势与局限性
  • 优势:SLAM 受体表达稳定,长期传代后病毒敏感性波动<10%,实验重复性优于原代细胞;增殖速度快于 CHO 等细胞系,病毒培养周期缩短 30%-40%,适合高通量实验;兼容贴壁与悬浮培养,可实现从实验室研究到工业化生产的无缝衔接;对多种 SLAM 依赖型病毒敏感,适用范围覆盖犬瘟热、麻疹、牛瘟等重要病毒,应用价值广泛。

  • 局限性:SLAM 表达可能受培养条件影响(如血清浓度),需严格控制培养参数;作为仓鼠细胞,与人源 SLAM 存在物种差异,部分人病毒研究需结合人源细胞验证;对非 SLAM 依赖型病毒敏感性低,应用范围存在局限。

四、培养与实验注意事项
  • 培养条件:常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,添加 400μg/mL G418 维持抗性筛选,37℃、5% CO₂培养箱中生长良好。传代时控制融合度在 60%-70%,采用温和方法分离细胞,避免过度处理影响受体表达。悬浮培养可采用无血清培养基逐步驯化,最终细胞密度可达 5×10⁶个 /mL,病毒产量无明显下降。

  • 质控与安全:定期通过流式细胞术检测 SLAM 膜表达量,病毒感染实验验证敏感性;STR 鉴定确保细胞纯度,支原体检测需为阴性。冻存使用含 10% DMSO 的wan全培养基,液氮保存可维持活性 5 年以上,复苏后传代 2 次待状态稳定后再用于实验,涉及高致病性病毒时需在相应生物安全实验室操作。

五、研究意义
BHK/slam/v 细胞系的建立为 SLAM 依赖型病毒研究提供了标准化工具,推动了对副黏病毒科病毒入侵机制的理解。在基础研究中,其助力阐明 SLAM 受体在病毒跨物种传播中的作用,为新发传染病预警提供理论支持;在应用领域,其提升了相关疫苗与药物的研发效率,尤其对动物疫病防控体系的完善具有重要意义。随着基因编辑技术的应用(如引入人源化 SLAM 突变),该细胞系将更贴近人类病毒研究需求,进一步拓展其临床转化价值。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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