CHO-K1中国仓鼠卵巢细胞系亚株，上皮样，贴壁生长，遗传更稳定，易培养，转染效率高，适用于重组蛋白生产及药物研发。

来源与形态：该亚株源自 CHO-K1 细胞系，通过单细胞克隆、抗性筛选或基因编辑技术获得，纯度与均一性显著优于母系。体外培养时呈典型上皮样形态，贴壁生长，细胞呈多边形，排列紧密且边界清晰，形态一致性高，无明显异质性。在 37℃、5% CO₂的培养环境中，增殖稳定，传代周期约 2-3 天，可适应贴壁培养、悬浮培养及无血清培养基体系，高密度培养时细胞存活率仍能保持在 90% 以上。

遗传特征：核型为非整倍体，染色体数目约 20-22 条，核型稳定性优于母系细胞，长期传代后仍能维持基因组的一致性。部分亚株通过基因改造引入特定特性，如缺失特定代谢基因（便于筛选）或整合抗性标记（利于外源基因稳定表达），基因组背景清晰，对外源基因的容纳能力强，转染后可高效表达目标蛋白。

优势：遗传均一性高，实验重复性好，批间差异小；蛋白表达效率高且稳定，翻译后修饰能力优异，产物生物活性强；培养适应性广，可在多种培养体系中高效增殖，便于实验室研究与工业化生产衔接；被 FDA、EMA 等国际监管机构认可，是生物药生产的合规细胞系，应用范围覆盖从基础研究到商业化生产的全链条。

局限性：部分亚株因基因改造可能对特定营养成分有依赖（如缺失某代谢基因需外源补充），增加培养成本；悬浮培养时易形成小聚集体（直径通常＜100μm），可能影响蛋白分泌的均一性；与人类细胞的糖基化模式仍存在细微差异，少数蛋白的体内活性可能受影响，需通过培养基优化或基因编辑进一步改良。

培养条件：常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基，添加青mei素 - 链mei素预防污染。生产阶段多采用化学成分明确的无血清培养基，减少外源因子干扰，提升产物纯度。培养过程中需控制溶氧（30%-50% 饱和度）、pH（7.2-7.4）及葡萄糖浓度（2-4g/L），避免营养耗竭或代谢废物积累。

污染防控：贴壁细胞易受支原体污染，需每周通过 PCR 检测；冻存时使用含 10% DMSO 的冻存液，梯度降温后保存于液氮中，复苏时 37℃快速解冻，离心去除 DMSO 以减少细胞损伤，复苏后传代 1-2 次，待细胞状态稳定后再用于实验。