技术文章
TECHNICAL ARTICLES详细介绍
来源与形态:该亚系克隆源自中国仓鼠卵巢组织的 CHO 母系细胞,经单细胞克隆技术筛选获得纯度>99% 的均一群体。体外培养时呈典型上皮样形态,贴壁生长,细胞呈多边形,排列紧密且边界清晰,形态一致性显著优于未克隆的 CHO 细胞。在 37℃、5% CO₂的培养条件下,增殖稳定,传代周期约 2-3 天,可适应贴壁培养、悬浮培养及无血清培养基体系,高密度培养时细胞存活率仍能保持在 90% 以上。
遗传特征:核型为非整倍体,染色体数目约 20-22 条,核型稳定性突出,长期传代(>50 代)后仍能维持基因组的一致性。部分亚系通过基因编辑引入特定标记(如抗性基因、荧光标签),便于外源基因筛选与追踪。其显著特点是对外源基因的容纳能力强,转染效率可达 60% 以上,且能稳定表达目标蛋白,翻译后修饰系统完善,可模拟人类细胞的糖基化、磷酸化模式。
重组蛋白高效生产
基因工程与功能研究
药物筛选与毒性评估
优势:遗传均一性高,实验重复性好,批间差异<10%;蛋白表达效率与修饰能力优异,产物活性接近天然蛋白;培养适应性强,可在多种体系中生长,便于实验室研究与工业化生产衔接;被 FDA、EMA 等机构认可为合规生产细胞系, regulatory 风险低。
局限性:部分亚系对血清批次敏感,需使用化学成分明确的培养基;长期悬浮培养可能出现细胞聚集体(直径<200μm),影响传质效率;对某些多亚基蛋白的表达能力有限,需通过基因优化或共表达辅助蛋白提升产量。
培养条件:常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,添加青mei素 - 链mei素预防污染。生产阶段推荐使用无血清、无蛋白培养基(如 CD CHO),并控制溶氧(30%-50%)、pH(7.2-7.4)及葡萄糖浓度(4-6g/L)。贴壁培养时融合度不宜超过 85%,悬浮培养密度控制在 1×10⁶-3×10⁶ cells/mL。
污染防控:定期通过 PCR 检测支原体,每批次细胞进行 STR 鉴定确保遗传一致性;冻存时使用含 10% DMSO 的冻存液,液氮保存可维持活性 5 年以上,复苏时 37℃快速解冻并离心去除 DMSO,传代 2 次后再用于实验。
中国仓鼠卵巢细胞系(亚系克隆)的出现推动了生物制药从实验室到产业化的跨越。其克隆化特性解决了 CHO 母系细胞异质性导致的生产波动问题,使重组蛋白药物的质量可控性大幅提升。在基础研究中,其为解析基因功能、蛋白修饰机制提供了标准化模型,助力阐明多种疾病的分子机制。随着合成生物学技术的应用(如设计人工染色体表达复杂蛋白),该亚系的应用潜力将进一步拓展,持续yin领生物制药领域的创新发展。
以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。
产品咨询
相关产品
型号:BY-1308
型号:BY-1308
型号:BY-1308
型号:BY-1308
Copyright©2025 上海乾思生物科技有限公司 版权所有 备案号:沪ICP备2023041625号-7 sitemap.xml 技术支持:化工仪器网 管理登陆