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来源与形态:CHO-K1 源自中国仓鼠卵巢细胞(CHO),通过单细胞克隆技术筛选获得纯度更高的亚系。体外培养时呈典型上皮样形态,贴壁生长,细胞呈多边形,排列紧密且边界清晰,较野生型 CHO 细胞形态更均一。在 37℃、5% CO₂的培养条件下,增殖速度稳定,传代周期约 2-3 天,可适应贴壁培养、悬浮培养及无血清培养基体系,尤其适合高密度培养。
遗传特征:保留 CHO 细胞的非整倍体核型(染色体数目约 20-22 条),但核型更稳定,基因组背景清晰,无内源性病毒序列。与 dhFr 缺陷型 CHO 细胞不同,CHO-K1 为原型细胞系,不携带营养缺陷标记,可自主合成核酸前体物质,无需依赖外源性营养补充。其基因组对外源基因的容纳能力强,转染后可通过抗性筛选快速获得稳定表达株,且长期传代后仍能维持目标蛋白的表达稳定性。
重组蛋白表达与药物生产
基因功能与信号通路研究
药物筛选与毒性评估
优势:培养条件简单,无需特殊营养补充,适合实验室小规模研究与工业化大规模生产;遗传稳定性高,实验重复性好,被国际监管机构(如 FDA、EMA)认可为生物药生产的合规细胞系;对外源基因的兼容性强,可表达多种类型的重组蛋白,且表达量稳定。
局限性:重组蛋白表达量通常低于 dhFr 缺陷型 CHO 细胞(需通过基因编辑或培养优化提升产量);部分复杂蛋白(如多亚基蛋白)的表达效率较低,可能受限于细胞自身的折叠与组装能力;长期悬浮培养可能出现细胞聚集体,影响蛋白纯化效率。
培养条件:常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 或 MEM 培养基,添加青mei素 - 链mei素预防污染。若用于蛋白生产,可改用化学成分明确的无血清培养基,减少外源蛋白干扰。培养过程中需控制细胞密度(贴壁培养融合度不超过 85%),避免过度密集导致细胞形态改变或增殖停滞。
污染防控:贴壁细胞易受支原体、真菌污染,需定期通过 PCR 或荧光染色检测;冻存时使用含 10% DMSO 的冻存液,液氮保存可长期维持活性,复苏时 37℃快速解冻并离心去除 DMSO,降低细胞损伤风险。
以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。
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