T7 pol/p/N BHK(Tet0n仓鼠胚肾细胞系，成纤维样，贴壁生长，含 T7 聚合酶与 Tet0n 系统，可调控基因表达，适用于病毒载体构建、蛋白表达调控及相关机制研究。

来源与构建：该细胞系以 BHK-21 仓鼠胚肾细胞为亲本，通过两步转染法构建：先导入含 T7 RNA 聚合酶基因的表达载体（含新mei素抗性基因），筛选获得稳定表达株；再转入 Tet0n 系统元件（含四环素应答启动子 TRE 与嘌呤霉素抗性基因），经双重抗性筛选获得最终细胞系。“T7 pol/p/N" 标识其含 T7 聚合酶（T7 pol）及双抗性筛选标记（p 嘌呤霉素、N 新mei素），“Tet0n" 明确其诱导表达特性。

形态与增殖：体外培养呈典型成纤维样形态，贴壁生长，细胞呈长梭形，排列疏松，边界清晰，核质比适中。在 37℃、5% CO₂条件下，增殖周期约 24-30 小时，适应含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，传代 50 次以上仍保持稳定生长速率，T7 聚合酶表达及诱导系统活性无明显衰减，冻存复苏后存活率达 85% 以上。

表达特征：该细胞系的核心功能在于基因表达调控：基础状态下（无诱导剂），Tet0n 系统处于沉默状态，外源基因表达量＜基础值的 1%；加入四环素类似物（如多xi环素，1μg/mL）后，TRE 启动子被激活，T7 聚合酶介导外源基因（含 T7 启动子）高效转录，表达量可提升 100-1000 倍（通过荧光蛋白报告基因验证），且诱导反应迅速（2-4 小时达峰值），撤去诱导剂后 24 小时内表达量降至基础水平，调控动态范围显著优于普通诱导系统。

优势：诱导效率高且调控范围广，可实现外源基因从 “沉默" 到 “高表达" 的精准切换；T7 聚合酶与 T7 启动子的特异性结合，避免内源性 RNA 聚合酶干扰，表达特异性强；兼容多种外源基因载体，适用范围覆盖病毒基因组、全长 cDNA 及小片段基因；培养条件简单，贴壁牢固，操作便捷，适合实验室常规操作。

局限性：高浓度诱导剂（＞2μg/mL）可能对细胞产生轻微毒性（增殖速率下降 10%-15%），需优化诱导浓度；部分外源基因的高表达可能导致细胞应激反应（如未折叠蛋白反应），需结合压力应答抑制剂使用；作为仓鼠细胞，翻译后修饰（如糖基化）与人类细胞存在差异，重组蛋白功能研究需结合人源细胞验证。

培养条件：常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，添加 400μg/mL G418 与 2μg/mL 嘌呤霉素维持双抗性筛选，37℃、5% CO₂培养箱中生长良好。传代时控制融合度在 70%-80%，采用温和方法分离细胞，避免过度处理影响细胞活性。诱导实验前需更换无四环素血清培养基，消除血清中诱导剂干扰。

质控与安全：定期通过 Western blot 检测 T7 聚合酶表达，荧光报告基因实验验证诱导效率（确保诱导倍数＞100 倍）；STR 鉴定排除交叉污染，支原体检测需为阴性。冻存使用含 10% DMSO 的wan全培养基，液氮保存可维持活性 5 年以上，复苏后传代 2 次待状态稳定后用于实验，涉及病毒操作时需符合相应生物安全等级要求。