CHO-TIM-1-Fc中国仓鼠卵巢细胞株细胞系，上皮样，贴壁或悬浮生长，稳定表达 TIM-1-Fc 融合蛋白，适用于病毒感染机制研究、抗病du药物筛选及免疫相关实验。

来源与构建：该细胞系以 CHO-S 细胞为亲本，通过电穿孔转染法导入含 TIM-1 胞外域（IgV 与黏蛋白结构域）与 IgG1 Fc 段的融合基因表达载体，经 Zeocin 抗性筛选及单克隆纯化获得稳定株，“TIM-1-Fc" 明确标识其表达的融合蛋白组成。构建过程中采用 CMV 启动子驱动表达，结合信号肽优化序列，使融合蛋白分泌效率提升 30%，且 90% 以上以可溶性形式存在于培养上清中，便于纯化与功能研究。

形态与增殖：体外培养呈上皮样形态，可适应贴壁与悬浮两种生长模式，悬浮培养时形成直径 20-40μm 的松散聚集体，细胞轮廓清晰，活力长期维持在 90% 以上。在 37℃、5% CO₂条件下，增殖周期约 30-36 小时，适应无血清化学限定培养基（如 CD OptiCHO Medium），高密度培养时细胞密度可达 9×10⁶个 /mL，传代 80 次以上仍保持稳定生长速率，融合蛋白表达量无明显衰减，冻存复苏后存活率超 85%。

表达特征：该细胞系分泌的 TIM-1-Fc 融合蛋白兼具 TIM-1 的病毒结合活性与 Fc 段的纯化便利性：分子量约 65kDa（SDS-PAGE 检测），TIM-1 部分可特异性结合病毒包膜蛋白（如流感病毒血凝素、登革病毒 E 蛋白），Fc 段可通过 Protein A 亲和层析高效纯化（纯度超 98%）。其结合常数（KD）达 1.2×10⁻⁸ M（针对流感病毒 H1N1 株），与天然 TIM-1 受体活性相当，且热稳定性优异（4℃保存 30 天活性保留率超 90%）。

优势：TIM-1-Fc 融合蛋白表达稳定，长期传代后活性波动＜8%，实验重复性强；融合蛋白兼具病毒结合与 Fc 段纯化优势，无需额外标签即可高效分离；可悬浮高密度培养，蛋白产量达 3-4g/L（流加培养），降低原料生产成本；对多种病毒具有结合活性，适用范围覆盖呼吸道病毒、虫媒病毒等，研究价值广泛。

局限性：融合蛋白的 TIM-1 部分为仓鼠源，与人源 TIM-1 存在细微序列差异，部分人类病毒研究需结合人源化改造株；悬浮培养时聚集体过大会导致蛋白分泌效率下降，需控制搅拌速率（100-120 rpm）；对非 TIM-1 依赖型病毒无结合活性，应用范围存在局限。

培养条件：悬浮培养推荐使用无血清化学限定培养基，添加 50μg/mL Zeocin 维持抗性筛选，37℃、5% CO₂环境中搅拌培养。传代时维持细胞密度在 2×10⁵-7×10⁶个 /mL，避免营养匮乏影响蛋白表达。流加培养阶段，补加葡萄糖（维持浓度 4-6g/L）与氨基酸混合液，可延长蛋白分泌期至 14 天以上。

质控与安全：定期通过 Western blot 检测融合蛋白表达，ELISA 验证病毒结合活性；STR 鉴定排除交叉污染，支原体检测需为阴性。冻存使用含 10% DMSO 的无血清冻存液，液氮保存可维持活性 5 年以上，复苏后传代 2 次待状态稳定后用于实验，涉及活病毒操作需符合生物安全二级标准。