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CHO-E0中国仓鼠卵巢细胞株细胞系
产品型号:BY-1350
简要描述:

CHO-E0中国仓鼠卵巢细胞株细胞系,上皮样,贴壁或悬浮生长,遗传稳定,蛋白表达高效且适配性强,适用于基础研究、重组蛋白生产及药物开发工艺优化,应用前景广泛。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

CHO-E0中国仓鼠卵巢细胞株细胞系
CHO-E0中国仓鼠卵巢细胞株细胞系是 CHO 细胞家族中经筛选驯化获得的通用型亚型,因遗传背景稳定、蛋白表达适配性强且培养成本可控,成为基础研究、重组蛋白生产及药物开发工艺优化的多功能细胞模型。其保留 CHO 细胞典型的上皮样形态与生长特性,同时通过自然筛选增强了对不同表达载体的兼容性,为生物制药研发的全流程提供了稳定可靠的细胞平台。
一、细胞来源与基本特性
  • 来源与驯化:该细胞系源自 CHO-K1 细胞,通过多轮非选择性传代与适应性培养获得:初期以广谱表达能力为指标,筛选能稳定表达多种外源蛋白(如细胞因子、抗体片段)的克隆;后续经含血清与无血清培养基双向适应,增强培养模式的灵活性,最终获得 CHO-E0 株系。“E0" 代表其作为 “基础型(E)零改造(0)" 细胞的特性,标识其未引入外源基因改造的通用属性。

  • 形态与增殖:体外培养呈典型上皮样形态,贴壁生长时呈多角形,排列规则;悬浮培养形成直径 20-60μm 的松散聚集体,细胞圆润饱满,活力长期维持在 93% 以上。37℃、5% CO₂条件下,增殖周期约 26-32 小时,兼容含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基与多种无血清化学限定培养基,传代 150 次以上仍保持稳定生长速率,外源蛋白表达量波动<10%,冻存复苏后存活率超 90%。

  • 表达特征:该细胞系的核心优势在于广谱适配性:转染不同类型表达载体(如质粒、病毒载体)后,重组蛋白表达量可达 2-5g/L(流加培养),尤其对难表达蛋白(如膜蛋白、多亚基复合体)的适配性突出。以 G 蛋白偶联受体(GPCR)表达为例,其膜定位率达 85% 以上,比普通 CHO-K1 提升 20%,且受体配体结合活性保留率超 90%,为功能研究提供高质量样本。

二、核心应用领域
  1. 基础研究模型构建

该细胞系是基因功能验证与信号通路研究的理想工具。在蛋白互作研究中,通过共转染目标蛋白与荧光标记载体,可清晰观察蛋白在细胞内的共定位(如通过 FRET 技术检测激酶与底物的相互作用);在信号通路解析中,其对多种刺激(如细胞因子、小分子化合物)的响应稳定,可量化分析 MAPK、PI3K 等通路的激活强度(Western blot 检测磷酸化水平差异),实验重复性达 90% 以上。
  1. 重组蛋白生产

作为通用型生产基质,其适用于多种重组蛋白的中试生产。生产重组ren干扰素 -α 时,表达量达 3.2g/L,抗病毒活性达 1.8×10⁸ IU/mg;生产单域抗体(VHH)时,无需复杂纯化即可获得纯度 90% 以上的产品,且热稳定性优异(60℃处理 30 分钟活性保留 80%)。因培养成本仅为高表达亚型的 60%-70%,尤其适合科研级小批量蛋白生产。
  1. 药物开发工艺优化

在药物研发中,该细胞系可用于生产工艺参数的摸索。通过测试不同培养基成分、pH 值与溶氧条件对蛋白表达的影响,可快速确定zuiyou工艺(如发现将谷an酰胺浓度控制在 4mM 时,抗体表达量提升 15%);其对基因编辑工具(如 CRISPR/Cas9)的高耐受性,也使其成为细胞系改造的理想起始材料,可通过敲除唾液酸转移酶等基因优化蛋白糖型。
三、培养方法
  • 贴壁培养操作

  1. 复苏:从液氮取出冻存管,37℃水浴 1-2 分钟解冻,转移至含 10mL 预热培养基(DMEM/F12+10% 胎牛血清)的离心管,1000rpm 离心 5 分钟,重悬后接种至 T75 培养瓶,37℃、5% CO₂培养箱静置培养。

  1. 换液:接种 24 小时后更换培养基,去除未贴壁细胞,此后每 48 小时换液一次,维持培养基 pH 7.2-7.4。

  1. 传代:当细胞融合度达 80%-90% 时,弃培养基,PBS 清洗 2 次,加入 2mL 0.25% yi酶 - EDTA,37℃孵育 2-3 分钟,镜检细胞脱落后加入 8mL 培养基终止消化,按 1:5 比例传代至新培养瓶。

  • 悬浮培养操作

种子细胞以 2×10⁵个 /mL 密度接种至 125mL 摇瓶(工作体积 30mL),使用含 4% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,摇床转速 110rpm,37℃、5% CO₂培养,每 2-3 天传代一次,维持细胞密度 1×10⁶-5×10⁶个 /mL,逐步降低血清浓度至无血清状态。
  • 冻存流程:取对数生长期细胞,1000rpm 离心 5 分钟,用冻存液(70% wan全培养基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO)重悬至 5×10⁶个 /mL,分装至冻存管,程序降温盒 - 80℃过夜,次日转移至液氮保存,保存期可达 5 年以上。

四、优势与局限性
  • 优势:遗传稳定性优异,长期传代无明显表型漂移;对不同表达载体兼容性强,无需针对特定蛋白优化细胞系;培养条件宽松,可在含血清与无血清培养基间灵活切换;成本可控,适合大规模基础研究与工艺开发。

  • 局限性:重组蛋白表达量低于专项改造株(如 CHO-D3b);对部分复杂糖基化蛋白的修饰能力有限;悬浮培养时聚集体大小不均一(10-100μm),需优化搅拌参数。

五、研究意义
CHO-E0 细胞系的建立为生物研究提供了标准化通用平台,其广谱适配性与稳定性能满足从基础研究到中试生产的多样化需求。在基础研究中,其助力构建统一的实验体系,减少因细胞背景差异导致的结果偏差;在应用领域,其作为工艺开发的 “起始模板",推动了生物制药生产参数的标准化,同时为低成本重组蛋白生产提供了可行方案,尤其对科研机构与中小企业的早期研发具有重要支撑作用,是连接基础研究与产业应用的关键桥梁。

 以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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