BHK-HTIGAR仓鼠肾细胞系，成纤维样，贴壁生长，稳定表达 HTIGAR 蛋白，可调控细胞代谢与增殖，适用于肿瘤代谢机制研究、抗癌药物筛选及相关功能实验。

来源与构建：该细胞系以 BHK-21 细胞为亲本，通过慢病毒介导将人源 HTIGAR 基因导入细胞基因组，经嘌呤霉素抗性筛选及单克隆纯化获得。HTIGAR 基因由 CMV 启动子驱动，C 端融合 FLAG 标签，便于蛋白检测与纯化，“HTIGAR" 标识其核心功能蛋白 —— 一种可激活磷酸果糖激酶、调控糖酵解的代谢调节因子。

形态与增殖：体外培养呈典型成纤维样形态，贴壁生长时呈长梭形，排列疏松，核仁清晰，细胞间连接疏松。37℃、5% CO₂条件下，增殖周期约 24-30 小时，适应含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，传代 80 次以上仍保持稳定生长速率，HTIGAR 表达量波动＜8%，冻存复苏后存活率超 85%。

功能特征：该细胞系的核心优势在于 HTIGAR 的代谢调控活性：与空载 BHK 细胞相比，其糖酵解速率降低 30%-40%（乳酸生成量检测），而磷酸戊糖途径活性提升 25%-35%（NADPH 生成量检测），同时细胞对氧化应激的抵抗能力增强（H₂O₂处理后存活率提升 2 倍），wan美模拟肿瘤细胞中 HTIGAR 介导的代谢重编程表型。

贴壁培养操作：

功能实验处理：

冻存流程：取对数生长期细胞，1000rpm 离心 5 分钟，用冻存液（70% wan全培养基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重悬至 4×10⁶个 /mL，分装至冻存管，程序降温盒 - 80℃过夜，次日转移至液氮保存，保存期可达 5 年以上。

优势：HTIGAR 表达稳定，代谢表型均一（批间差异＜10%）；FLAG 标签便于蛋白定位与互作研究；贴壁牢固，适合长时程代谢检测；可直接与空载 BHK 细胞对比，排除背景干扰。

局限性：仓鼠与人类代谢通路存在细微差异，需结合人源细胞验证；高表达 HTIGAR 可能导致细胞接触抑制减弱，传代时需严格控制密度；部分代谢检测需专用试剂盒，实验成本较高。