CHO-E2-Fc中国仓鼠卵巢细胞系，上皮样，贴壁或悬浮生长，稳定表达 E2-Fc 融合蛋白，活性稳定，适用于疫苗研发、免疫机制研究及相关药物筛选与生产。

来源与构建：该细胞系以 CHO-S 为亲本，通过慢病毒载体介导将 E2-Fc 融合基因导入细胞基因组，经 Zeocin 抗性筛选及单克隆纯化获得稳定株。融合基因由 EF1α 启动子驱动表达，E2 片段源自病毒包膜蛋白（如丙型肝炎病毒或冠状病毒），C 端连接人 IgG1 的 Fc 段，名称中 “E2-Fc" 直接标识其表达的核心功能蛋白 —— 兼具 E2 免疫原性与 Fc 段稳定性的融合分子。构建过程中引入信号肽优化序列，确保蛋白高效分泌至培养基（分泌效率达 90% 以上）。

形态与增殖：体外培养呈上皮样形态，贴壁生长时呈多角形，排列紧密；悬浮培养可形成直径 20-50μm 的松散聚集体，细胞轮廓清晰，活力长期维持在 92% 以上。37℃、5% CO₂条件下，增殖周期约 30-36 小时，适应含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基与多种无血清化学限定培养基，传代 80 次以上仍保持稳定生长速率，E2-Fc 表达量波动＜8%，冻存复苏后存活率超 89%。

功能特征：该细胞系的核心优势在于 E2-Fc 融合蛋白的双重功能特性：E2 部分保留天然病毒抗原表位（ELISA 检测与特异性抗体结合率＞95%），可诱导特异性免疫应答；Fc 段赋予蛋白更长半衰期（体外稳定性达 14 天以上），同时便于通过 Protein A 亲和层析快速纯化（纯度一步可达 95% 以上）。流式细胞术检测显示，细胞表面无 E2-Fc 滞留，98% 以上的表达蛋白分泌至培养基，避免了胞内积累导致的细胞毒性。

贴壁培养操作：

悬浮培养与蛋白纯化：

冻存流程：取对数生长期细胞，1000rpm 离心 5 分钟，用冻存液（80% 无血清培养基 + 10% 胎牛血清 + 10% DMSO）重悬至 6×10⁶个 /mL，分装至冻存管，程序降温盒 - 80℃过夜，次日转移至液氮保存，保存期可达 5 年以上，复苏后需在含 Zeocin 的培养基中培养 2-3 代以稳定表达。

优势：E2-Fc 蛋白表达稳定，批间活性差异＜7%；Fc 段便于快速纯化，纯化步骤较 His 标签蛋白减少 2 步；融合蛋白半衰期长（体外 4℃保存 14 天活性保留 90%）；与原代细胞相比，可无限传代且实验重复性高（变异系数＜6%）。

局限性：Fc 段可能干扰部分抗原表位的免疫识别，需结合无 Fc 标签的 E2 蛋白验证；高表达时（＞10μg/mL）可能抑制细胞增殖，需定期更换培养基；培养成本高于普通 CHO 细胞（因无血清培养基价格较高）。