L6大鼠骨骼肌成肌细胞系
L6大鼠骨骼肌成肌细胞系作为源自大鼠骨骼肌组织的成肌细胞模型，因保留完整的肌分化潜能，在骨骼肌发育、肌损伤修复及肌病机制研究中应用广泛，成为探究成肌细胞增殖分化调控及肌肉相关疾病的重要实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠骨骼肌原代成肌细胞，经永生化处理建立。细胞形态在增殖期呈长梭形，两端钝圆，排列呈平行束状，胞质内可见少量肌丝结构；融合分化后形成多核肌管，肌管长度可达 200μm 以上，约 30% 细胞融合成管。生长方式为贴壁生长，具有接触抑制特性，传代后 24 小时贴壁率达 94%。核心参数表现出成肌特征：倍增时间约 48 小时，处于增殖期的细胞活力旺盛；连续传代 50 次后仍保持正常二倍体核型（染色体数 42 条）；成肌细胞标志物肌动蛋白（α-actin）、肌调节因子 MyoD 免疫荧光染色阳性率达 95%；分化期肌球蛋白重链（MHC）表达量较增殖期升高 8.3 倍；无细菌、真菌、支原体及病毒污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在肌分化机制研究中，L6 细胞在低血清诱导下，48 小时内开始出现融合，72 小时形成成熟肌管，分化率可达 70%，其中肌分化关键基因 Myogenin 表达量增加 6.2 倍，可模拟骨骼肌细胞从增殖到分化的完整过程，为解析肌分化的分子调控网络提供理想模型。肌损伤修复研究方面，该细胞在胰岛素样生长因子 - 1（IGF-1）刺激下，增殖活性提升 45%，迁移能力增强 38%，肌管再生速度加快 2 倍，能很好地模拟体内肌卫星细胞修复损伤的过程，助力肌损伤修复机制的探究。药物筛选领域，该细胞对肌营养药物反应敏感，经肌酸处理后，细胞内 ATP 含量增加 35%，肌管直径增粗 20%，适用于评估肌营养药物及肌病治疗药物的疗效。此外，将该细胞与巨噬细胞共培养，可构建体外肌损伤炎症模型，用于研究炎症微环境对肌修复的影响。
培养与保存规范：增殖期推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，添加 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度的恒温培养箱。诱导分化时采用含 2% 马血清的 DMEM 培养基，更换频率为每 24 小时一次，诱导周期约 5-7 天。传代时采用含 0.25% 胰dan白酶的消化液处理，37℃孵育 3-5 分钟，待细胞间隙增大后加入含血清的培养基终止消化，传代比例为 1:3-1:4，每 3-4 天传代一次，维持细胞融合度在 60%-70% 以保持增殖活性。冻存液配方为基础培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏细胞存活率达 91% 以上，2-3 代内可恢复正常增殖分化能力。运输采用 T-25 培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物后进行后续实验。该细胞系仅限科研使用，操作时需避免频繁晃动培养瓶，防止细胞脱落。
L6 大鼠骨骼肌成肌细胞系以其稳定的增殖分化能力、明确的成肌标志物表达及易于培养的优势，在骨骼肌生物学研究与相关疾病药物开发中发挥着重要作用，为揭示肌肉发育规律和开发肌病治疗策略提供了可靠的实验平台。
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