CHO/APRT-20中国仓鼠卵巢细胞系，上皮样，贴壁生长，APRT 基因缺陷，嘌呤代谢异常，适用于嘌呤代谢研究、相关遗传病模型构建及靶向药物筛选。

来源与构建：该细胞系源自 CHO-K1 细胞，通过乙基甲烷磺酸（EMS）化学诱变结合选择性培养基筛选获得。APRT 基因发生移码突变导致蛋白功能wan全缺失，“APRT-20" 标识其为第 20 株稳定传代的缺陷克隆。构建过程未引入外源基因，仅通过自发突变与表型筛选获得，确保代谢表型的天然性，避免基因编辑可能带来的非特异性干扰。

形态与增殖：体外培养呈上皮样形态，贴壁生长时细胞轮廓清晰，较野生型 CHO 略小且排列紧密；因代谢缺陷，悬浮培养适应性较差，故主要以贴壁方式培养。37℃、5% CO₂条件下，增殖周期约 36-42 小时，较野生型延长 8-10 小时，需在培养基中补充腺嘌呤（50μg/mL）以维持正常增殖，传代 60 次以上 APRT 缺陷表型稳定，冻存复苏后存活率超 82%。

功能特征：核心优势在于嘌呤代谢通路的特异性阻断：APRT 缺失导致腺嘌呤无法转化为 AMP，使腺嘌呤在细胞内蓄积（浓度达野生型的 8-12 倍），并通过黄piao呤氧化酶转化为高毒性的 2,8 - 二羟基腺嘌呤（2,8-DHA），在选择性培养基（含腺嘌呤 + 次黄piao呤 + 氨蝶呤）中可与野生型细胞显著区分（缺陷株因无法利用腺嘌呤而死亡）。同时，其补救合成通路缺陷使细胞对嘌呤类似物（如 6 - 巯基嘌呤）敏感性提升 3-5 倍，为药物筛选提供du特表型。

贴壁培养操作：

选择性筛选操作：

冻存流程：取对数生长期细胞（确保腺嘌呤充足），1000rpm 离心 5 分钟，用冻存液（70% wan全培养基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO+50μg/mL 腺嘌呤）重悬至 5×10⁶个 /mL，分装至冻存管，程序降温盒 - 80℃过夜，次日转移至液氮保存，保存期可达 5 年以上，复苏后需立即补充腺嘌呤以恢复活力。

优势：APRT 缺陷表型稳定，代谢特征重复性高（批间差异＜7%）；无需基因编辑工具，保留细胞天然遗传背景；对嘌呤类似物敏感性高，药物筛选效率较野生型提升 3 倍；可直接用于 APRT 功能互补实验，验证基因治疗效果。

局限性：严格依赖腺嘌呤补充（缺省 24 小时即出现活力下降）；悬浮培养困难，大规模实验操作不便；长期培养可能积累适应性突变（约 10% 克隆出现部分代谢代偿），需定期通过鉴别培养基筛选纯化。