CHO/IL-4R + pGL4.23中国仓鼠卵巢细胞系，上皮样，贴壁生长，稳定表达 IL-4R 并携带 pGL4.23 报告载体，可响应 IL-4 信号，适用于免疫信号研究及相关药物筛选。

来源与构建：该细胞系以 CHO-K1 为亲本，通过两步转染法构建：首先通过慢病毒载体导入 IL-4Rα 链编码基因，筛选获得稳定表达 IL-4R 的细胞株；再通过脂质体转染将 pGL4.23 载体（含 IL-4 响应元件驱动的荧光素酶基因）整合入基因组，经嘌呤霉素与 hygromycin 双筛选获得阳性克隆。“IL-4R + pGL4.23" 标识其双重功能 —— 受体表达与报告响应，构建过程中采用 CMV 启动子驱动 IL-4R 表达，确保受体在细胞表面的稳定呈现（流式检测阳性率＞95%）。

形态与增殖：体外培养呈上皮样形态，贴壁生长时细胞铺展均匀，较野生型 CHO 略大；悬浮培养适应性较差，主要以贴壁方式培养。37℃、5% CO₂条件下，增殖周期约 34-40 小时，适应含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基，需同时添加两种抗生素（2μg/mL 嘌呤霉素 + 100μg/mL hygromycin）维持双基因稳定整合，传代 60 次以上受体表达量与报告活性波动＜8%，冻存复苏后存活率超 85%。

功能特征：核心优势在于信号响应的特异性与量化能力：IL-4 刺激后，IL-4R 与 γc 链形成异二聚体，激活 JAK1/3-STAT6 通路，使 pGL4.23 载体中的 STAT6 结合元件驱动荧光素酶表达，酶活性与 IL-4 浓度呈剂量依赖性（有效范围 0.1-100ng/mL，EC50=2.3ng/mL）。与天然表达 IL-4R 的细胞相比，其背景信号低（未刺激时荧光素酶活性＜5% 最大响应值），信号 - to-noise 比值达 40:1，显著优于传统报告系统。

贴壁培养操作：

信号响应检测流程：

冻存流程：取对数生长期细胞，1000rpm 离心 5 分钟，用冻存液（70% wan全培养基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO + 双抗生素）重悬至 5×10⁶个 /mL，分装至冻存管，程序降温盒 - 80℃过夜，次日转移至液氮保存，保存期可达 5 年以上，复苏后需培养 2-3 代再进行信号检测以确保稳定性。

优势：IL-4R 表达稳定，信号响应特异性强（对 IL-13 等同源细胞因子交叉反应＜5%）；pGL4.23 报告系统灵敏度高，检测下限达 0.1ng/mL IL-4；双抗生素筛选确保基因整合稳定性；实验重复性优异（变异系数＜7%），适合高通量筛选。

局限性：仅反映 IL-4R/STAT6 通路，无法模拟复杂免疫微环境中的交叉调控；贴壁依赖性限制了悬浮高通量筛选；长期传代可能出现报告载体沉默（约 5% 克隆 / 60 代），需定期通过荧光素酶活性验证。