RNCEC/HL-028大鼠正常结肠上皮细胞系
RNCEC/HL-028大鼠正常结肠上皮细胞系作为源自大鼠结肠黏膜组织的正常上皮细胞模型，因保留结肠上皮的屏障功能及物质吸收特性，在结肠黏膜稳态维持、肠道炎症机制及结直肠癌变早期研究中具有重要价值，成为探究结肠上皮生理功能及相关疾病的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠结肠中段黏膜组织，经原代培养和纯化获得。细胞形态呈柱状，部分呈高柱状，胞体大小均匀（直径约 12-16μm，长度约 20-25μm），胞质丰富且呈弱嗜酸性，可见散在的吸收小泡，约 10% 细胞可见刷状缘结构，细胞核呈椭圆形，位于细胞基底部，核仁不明显。生长方式为贴壁生长，呈单层有序排列，具有明显的接触抑制现象，传代后 24 小时贴壁率达 93%。核心参数表现出正常结肠上皮细胞特征：倍增时间约 75 小时，连续传代 16 次后仍保持稳定的生物学特性；表面标志物表达du特，细胞角蛋白 20（CK20）阳性率达 96%，上皮细胞黏附分子（EpCAM）阳性率 95%，紧密连接蛋白 ZO-1 阳性率 94%；具有正常的二倍体核型（染色体数 42 条），无染色体畸变；细胞间连接紧密，跨上皮电阻值达 400Ω・cm²，能有效阻挡大分子物质透过；可吸收葡萄糖和短链脂肪酸，葡萄糖转运速率达 25nmol/(h・mg 蛋白)；无微生物污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在结肠黏膜屏障功能研究中，RNCEC/HL-028 细胞经脂多糖（LPS）处理 24 小时后，跨上皮电阻值下降 45%，紧密连接蛋白 occludin 表达量减少 40%，炎症因子 IL-1β 分泌量增加 4.2 倍，可模拟肠道感染时结肠屏障的损伤过程，为解析肠道屏障破坏机制提供理想模型。
在肠道炎症研究方面，该细胞经肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）处理 48 小时后，凋亡率增加 35%，黏膜修复相关因子 TGF-β1 表达量提升 50%，迁移速率增加 55%，可模拟溃疡性结肠炎中结肠上皮的损伤与修复过程，适用于探究肠道炎症的发病机制及评估抗炎药物疗效。
结直肠癌变早期研究领域，该细胞经氧化偶氮甲烷（AOM）处理后，增殖标志物 Ki67 阳性率增加至 42%，抑癌基因 p53 表达量下降 38%，细胞形态出现轻度异型性，能很好地模拟结直肠癌变早期的细胞变化，为筛选结直肠癌早期预警标志物提供实验基础。此外，该细胞与肠道菌群共培养时，乳酸杆菌可使细胞的紧密连接蛋白表达量增加 30%，炎症因子分泌量减少 25%，可用于探究肠道菌群与结肠上皮的相互作用机制。
培养与保存规范：推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/Ham's F-12 培养基，添加 20ng/mL 表皮生长因子（EGF）、1% 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒混合液及 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2-3 天更换一次，以维持细胞的正常功能。传代时，用 PBS 冲洗细胞 2 次，加入专用细胞解离液，37℃孵育 10-12 分钟，待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落，传代比例为 1:2-1:3，每 7-8 天传代一次，避免过度传代导致刷状缘结构减少。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，细胞浓度调整为 2×10⁶个 /ml，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏存活率达 85% 以上，3-4 代内可恢复正常的生长和吸收功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物且排列整齐后进行实验。该细胞系仅限科研使用，操作时需避免频繁扰动培养瓶，以防影响细胞极性。
RNCEC/HL-028 大鼠正常结肠上皮细胞系以其稳定的结肠上皮特性、完整的屏障功能及正常的物质吸收能力，在结肠生物学研究与肠道疾病机制探索中发挥着重要作用，为揭示肠道疾病的发病机制和开发新型治疗药物提供了可靠的细胞模型。
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