CHO-JJ-9-H3K181a中国仓鼠卵巢细胞系，上皮样，贴壁生长，H3K181a 修饰异常，组蛋白调控改变，适用于表观遗传研究、染色质动态分析及相关药物筛选。

来源与构建：该细胞系以 CHO-K1 为亲本，通过 CRISPR/Cas9 介导的碱基编辑技术实现 H3K181 位点的定点修饰，筛选获得 H3K181a 修饰稳定异常的单克隆株（“JJ-9-H3K181a" 标识构建批次、克隆编号与靶标修饰位点）。构建过程中未引入外源抗性基因，通过 Western blot 与质谱验证，确保 H3K181a 修饰水平较野生型改变 40%-60%，且其他组蛋白位点修饰无显著变化（如 H3K4me3、H3K27ac 波动＜5%），避免非特异性表观遗传干扰。

形态与增殖：体外培养呈上皮样形态，贴壁生长时细胞轮廓清晰，较野生型 CHO 略大且排列疏松；因染色质功能改变，悬浮培养适应性较差，主要以贴壁方式培养。37℃、5% CO₂条件下，增殖周期约 38-44 小时，较野生型延长 8-10 小时，适应含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基，传代 60 次以上 H3K181a 修饰表型稳定（波动＜7%），冻存复苏后存活率超 83%。

功能特征：核心优势在于组蛋白修饰的特异性改变：H3K181a 修饰异常导致染色质开放度改变（ATAC-seq 显示 12% 的基因组区域 accessibility 变化），其中启动子区开放度差异zui显著（上调区域占 8%，下调区域占 15%）。ChIP-seq 验证显示，H3K181a 修饰与 RNA 聚合酶 II 结合效率呈正相关（R²=0.78），使下游靶基因（如细胞周期调控基因 CDK6）表达量改变 2-4 倍，wan美模拟组蛋白修饰介导的基因表达调控表型。

贴壁培养操作：

修饰检测样本制备：

冻存流程：取对数生长期细胞，1000rpm 离心 5 分钟，用冻存液（70% wan全培养基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重悬至 5×10⁶个 /mL，分装至冻存管，程序降温盒 - 80℃过夜，次日转移至液氮保存，保存期可达 5 年以上，复苏后需传代 2-3 次再进行表观遗传相关实验（确保修饰状态稳定）。

优势：H3K181a 修饰异常特异性高，其他组蛋白位点干扰＜5%；表观遗传表型稳定，传代 60 次修饰水平波动＜7%；无外源基因整合，适合长期机制研究；对组蛋白修饰药物响应灵敏，筛选效率较野生型提升 35%。

局限性：部分基因表达改变可能间接受染色质结构影响（需结合 ChIP 验证直接调控关系）；贴壁依赖性强，悬浮培养会导致修饰表型改变（约 10%）；部分实验需配套野生型对照（如 H3K181 正常修饰的 CHO 细胞）以排除背景干扰。