IEC-6大鼠小肠上皮细胞系
IEC-6大鼠小肠上皮细胞系作为源自大鼠小肠隐窝的正常上皮细胞模型,因保留小肠上皮的增殖分化特性及物质吸收功能,在肠黏膜屏障稳态、营养吸收机制及肠道疾病病理研究中具有重要价值,成为探究小肠上皮生理功能及相关疾病的关键实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠小肠上段隐窝组织,经原代培养和纯化获得。细胞形态呈上皮样,多为立方形或短柱状,胞体大小均匀(直径约 14-18μm),胞质丰富且呈嗜酸性,可见较多的线粒体和内质网,约 12% 细胞可见刷状缘结构,细胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞基底部,核仁清晰。生长方式为贴壁生长,呈单层铺路石样排列,具有明显的接触抑制现象,传代后 24 小时贴壁率达 92%。核心参数表现出正常小肠上皮细胞特征:倍增时间约 62 小时,连续传代 18 次后仍保持稳定的生物学特性;表面标志物表达du特,细胞角蛋白 18(CK18)阳性率达 95%,小肠上皮标志物绒毛蛋白(villin)阳性率 93%,上皮细胞黏附分子(EpCAM)阳性率 91%;具有正常的二倍体核型(染色体数 42 条),无染色体畸变;细胞间连接紧密,紧密连接蛋白 ZO-1、occludin 表达丰富,跨上皮电阻值达 350Ω・cm²;能主动吸收葡萄糖和氨基酸,葡萄糖转运速率达 32nmol/(h・mg 蛋白);可分泌肠三叶因子(TFF3),基础分泌量达 38ng/mL;无微生物污染,细胞纯度达 96%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在肠黏膜修复研究中,IEC-6 细胞经表皮生长因子(EGF)处理 48 小时后,迁移速率增加 58%,增殖活性提升 45%,绒毛蛋白表达量增加 3.2 倍,可模拟小肠黏膜损伤后的修复过程,为解析肠上皮再生机制提供理想模型。
在营养吸收机制研究方面,该细胞经胰岛素处理后,葡萄糖转运蛋白 GLUT2 表达量增加 4.2 倍,葡萄糖吸收速率提升 60%,氨基酸转运体 B⁰AT1 表达量增加 3.5 倍,可模拟胰岛素对小肠营养吸收的调控过程,适用于探究营养物质吸收的分子机制。
肠道疾病研究领域,该细胞经脂多糖(LPS)处理后,炎症因子 IL-6 分泌量增加 4.5 倍,肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)表达量提升 3.8 倍,紧密连接蛋白 occludin 表达量下降 40%,能很好地模拟肠道感染引起的黏膜屏障破坏,为评估肠道抗炎药物的疗效提供实验基础。此外,该细胞与肠道菌群共培养时,乳酸杆菌可使细胞的紧密连接蛋白表达量增加 30%,炎症因子分泌量减少 25%,可用于探究肠道菌群与肠上皮的相互作用机制。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,添加 0.1U/mL 胰岛素、2mM 谷an酰胺及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2-3 天更换一次,以维持细胞的正常功能。传代时,用 PBS 冲洗细胞 2 次,加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 混合液,37℃孵育 8-10 分钟,待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落,传代比例为 1:3-1:4,每 5-6 天传代一次,避免过度传代导致分化能力下降。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,细胞浓度调整为 3×10⁶个 /ml,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)后,复苏存活率达 85% 以上,2-3 代内可恢复正常的生长和吸收功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输,收到细胞后需静置培养 24 小时,更换培养基后观察细胞形态,确认无异常漂浮物且排列整齐后进行实验。该细胞系仅限科研使用,操作时需避免频繁更换培养条件,以防影响其吸收功能。
IEC-6 大鼠小肠上皮细胞系以其稳定的小肠上皮特性、完整的吸收功能及典型的黏膜屏障构建能力,在肠道生物学研究与肠道疾病机制探索中发挥着重要作用,为揭示肠道疾病的发病机制和开发新型治疗药物提供了可靠的细胞模型。
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