hTERT-PBEC猪支气管上皮细胞系，hTERT-PBEC 为永生化猪支气管上皮细胞系，上皮样贴壁生长，表达气道上皮标志物，支持呼吸道病毒复制，适用于气道疾病、病毒感染机制及吸入制剂研发。

气道上皮标志物与分化功能：高表达气道特异性标志物，如细胞角蛋白 18（CK18，阳性率 97%）、黏液蛋白 5AC（MUC5AC，阳性率 95%），其 MUC5AC 分泌量达 20μg/10⁶细胞 / 天（2G9 几乎不表达）；纤毛摆动频率达 12 次 / 秒，能有效清除异物颗粒（清除率达 65%，2G9 无此功能），模拟气道黏膜的物理防御机制，与猪支气管组织的功能一致性达 92%。

屏障功能与免疫活性：跨上皮电阻（TEER）值达 550Ω・cm²（显著高于 2G9 的 200Ω・cm²），紧密连接蛋白 occludin 和 claudin-1 表达丰富；感染病毒后可快速分泌 Ⅰ 型干扰素（IFN-α 达 80pg/mL，是 2G9 的 3 倍），TLR3/7 表达量是 2G9 的 5 倍，先天免疫应答能力显著更强，更接近在体气道的免疫防御状态。

病毒敏感性谱：对呼吸道病毒（如 PRRSV、SIV）的感染效率达 96%，感染后 72 小时出现典型细胞病变（纤毛脱落、细胞融合），PRRSV 滴度达 10⁷.⁶ TCID₅₀/mL（是 2G9 的 80 倍）；因高表达唾液酸受体（SAα2,6）和 CD163 分子，对气道靶向病毒的吸附效率显著高于肾细胞系，尤其适合呼吸道病毒感染机制研究。

哮喘模型构建：通过该细胞系发现尘螨过敏原可诱导 MUC5AC 表达增加 3 倍，IL-8 分泌量上升 4 倍，与哮喘仔猪支气管黏液高分泌特征一致性达 93%（2G9 模型无法模拟），揭示 “过敏原 - 黏液过度分泌" 的疾病轴。

慢性阻塞性肺疾病（COPD）研究：在香烟烟雾提取物处理后，细胞抗氧化酶活性下降 50%，炎症因子 TNF-α 表达提升 2.5 倍，纤毛摆动频率降至 5 次 / 秒，模拟 COPD 的气道损伤过程，其病理指标与临床病例吻合度达 89%。

PRRSV 气道入侵机制：利用其气道上皮特性，发现病毒可通过破坏紧密连接蛋白（claudin-1 降解增加 40%）突破屏障，同时诱导上皮 - 间质转化（α-SMA 表达上升 3 倍），与 PRRSV 感染仔猪的支气管纤维化程度正相关（R²=0.91），研究结果较 2G9 模型更接近在体感染特征。

抗病毒天然免疫研究：在 SIV 感染后，细胞 RIG-I 样受体（RLR）通路激活，IFN-β 表达量 6 小时达峰值（120pg/mL），敲除 RIG-I 后病毒滴度提升 100 倍，证实天然免疫对流感病毒的抑制作用，其信号通路激活模式与猪支气管组织的吻合度达 90%。

药物递送效率检测：建立基于气道屏障的药物吸收模型，某雾化疫苗经该细胞系转运效率达 45%（2G9 模型仅 15%），与仔猪吸入免疫后的黏膜抗体水平相关性达 92%，被兽药企业列为吸入制剂的shou选评价模型。

气道毒性筛选：某抗生素雾化剂在该模型中显示黏膜损伤（TEER 值下降 60%），与仔猪气道黏膜糜烂的病理结果一致性达 88%（2G9 模型无此反应），可精准预测吸入药物的局部毒性。

培养基：BEGM 培养基添加 bovine pituitary extract（BPE）和表皮生长因子（EGF），pH 维持在 7.2-7.4；诱导分化需去除 EGF 并添加 1μM 视huang酸，培养 14 天后纤毛细胞比例可达 40%（2G9 无需此步骤）。

传代流程：当细胞融合度达 70% 时，按 1:2 比例接种（低于 2G9 的 1:6 比例），使用 0.05% yi酶 + EDTA 消化，离心速度 1000rpm，24 小时贴壁率超 90%，避免过度融合（＞80% 会导致纤毛分化受阻）。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的 BEGM 培养基，细胞密度 2×10⁶个 /mL，程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮，复苏时 37℃水浴 1 分钟，接种后 72 小时更换培养基，存活率可达 85%，需检测 MUC5AC 表达确认功能稳定。

病毒感染优化：细胞接种 Transwell 小室（孔径 0.4μm），培养 14 天形成分化单层后， apical 侧接种 PRRSV（MOI=0.1），37℃培养 72 小时，basolateral 侧病毒滴度可达 10⁷.⁶ TCID₅₀/mL，结果变异系数＜6%（2G9 为 12%）。

纤毛功能检测：使用高速摄像系统记录纤毛摆动频率，经 10ng/mL TNF-α 处理后频率下降 40%，可用于抗炎药物筛选。

优势：

局限性：