IPI-FX猪回肠上皮细胞株细胞系，上皮样贴壁生长，高表达肠黏膜屏障相关蛋白，对肠道致病菌敏感，适用于猪肠道屏障功能、感染机制及肠黏膜修复研究。

肠屏障标志物与屏障功能：高表达肠黏膜屏障特异性标志物，如闭锁小带蛋白 1（ZO-1，阳性率 98%）、黏蛋白 2（MUC2，阳性率 96%），其 ZO-1 在细胞间的线性表达率达 95%（PAM-T1R4-1 无此结构）；跨上皮电阻（TEER）值达 650Ω・cm²（显著高于 PAM-T1R4-1 的 150Ω・cm²），对 FITC - 葡聚糖的通透性仅为 PAM-T1R4-1 的 1/20，模拟回肠黏膜的物理屏障功能，与猪回肠组织的屏障特性一致性达 93%。

吸收与代谢功能：表达高水平的营养转运蛋白，如葡萄糖转运体 SGLT1（阳性率 97%）、氨基酸转运体 B⁰AT1（阳性率 95%），葡萄糖吸收效率达 80%（PAM-T1R4-1 几乎无吸收功能）；能分泌肠肽激素如胰高血糖素样肽 - 2（GLP-2），含量达 25pg/10⁶细胞 / 天，可促进自身增殖（细胞活力提升 30%），模拟回肠的营养感知与修复调控功能。

肠道免疫活性：表达 toll 样受体 4（TLR4，阳性率 90%），经脂多糖（LPS）刺激后，分泌白细胞介素 - 8（IL-8）达 600pg/10⁶细胞 / 24h（是 PAM-T1R4-1 的 1.5 倍），同时释放防御素 β2（DEFB2）达 40ng/10⁶细胞 / 24h，对肠道致病菌的抑菌率达 75%，天然免疫应答模式与猪回肠黏膜高度吻合。

屏障损伤与修复模型：通过该细胞系发现大肠杆菌黏附素可使 ZO-1 表达下降 45%，TEER 值降低 50%，而 GLP-2 处理可逆转这一损伤（ZO-1 恢复 70%），与仔猪腹泻模型的肠屏障修复规律一致性达 92%（PAM-T1R4-1 模型无法模拟），揭示 “致病菌 - 屏障破坏 - GLP-2 修复" 的调控轴。

营养物质对屏障的调控：在低纤维培养条件下，细胞 MUC2 分泌下降 35%，屏障通透性增加 40%，补充膳食纤维发酵产物丁酸后，MUC2 恢复至正常水平的 85%，证实短链脂肪酸对肠屏障的保护作用，其分子机制研究为饲料配方优化提供依据。

沙门氏菌入侵机制：利用其回肠上皮特性，发现沙门氏菌可通过 Ⅲ 型分泌系统分泌效应蛋白 SipA，促进细胞骨架重排（F - 肌动蛋白聚集增加 2 倍），入侵效率达 35%（PAM-T1R4-1 的入侵率仅 8%），与仔猪沙门氏菌病的回肠定植规律正相关（R²=0.91），研究结果较巨噬细胞模型更接近肠道感染特征。

耐药菌生物膜形成：在耐头孢噻呋大肠杆菌感染中，IPI-FX 细胞表面可观察到生物膜形成（覆盖率达 60%），而 PAM-T1R4-1 表面仅为 15%，通过转录组分析发现细胞外基质蛋白 FN1 表达上调是生物膜定植的关键，为抗生物膜药物研发提供靶点。

肠黏膜修复剂筛选：建立基于 TEER 值恢复率的高通量筛选模型，某植物提取物可使 LPS 损伤的 IPI-FX 细胞屏障功能恢复 70%，MUC2 分泌增加 40%，仔猪腹泻实验显示回肠绒毛高度增加 25%，证实模型的应用价值。

益生菌协同效应评价：在罗伊氏乳杆菌与细胞共培养实验中，可使大肠杆菌的黏附率下降 60%，IL-8 分泌减少 55%，且该过程依赖细胞 TLR2 的激活（敲除后保护作用消失），与 PAM-T1R4-1 的免疫激活机制形成肠道 - 肺部的差异对比。

培养基：DMEM/F12 培养基添加 10% 胎牛血清、20ng/mL 表皮生长因子（EGF），pH 维持在 7.2-7.4；为诱导分化，可添加 1μM 视huang酸，培养 14 天后微绒毛长度增加 2 倍（PAM-T1R4-1 无需此步骤）。

传代流程：当细胞融合度达 80% 时，使用 0.25% yi酶 + EDTA 消化（避免过度消化破坏紧密连接），按 1:3 比例接种（与 PAM-T1R4-1 相同），24 小时贴壁率超 90%，需定期检测 ZO-1 表达确认屏障功能。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 2×10⁶个 /mL，程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮，复苏时 37℃水浴 1 分钟，存活率可达 85%，通过 TEER 值测定验证功能稳定性（应≥500Ω・cm²）。

屏障功能检测：细胞接种 Transwell 小室（孔径 0.4μm），培养 10 天后检测 TEER 值（应≥600Ω・cm²），加入致病菌后 24 小时测定通透性变化，结果变异系数＜7%；PAM-T1R4-1 对照组用于对比免疫应答差异。

细菌黏附实验：将 CFSE 标记的大肠杆菌（MOI=100）与细胞共孵育 2 小时，流式细胞术检测黏附率（正常应＜10%），适合抗感染药物筛选。

优势：

局限性：