ST-2014S猪睾丸细胞悬浮适应株细胞系，上皮样悬浮生长，对猪繁殖与呼吸综合征病毒敏感，病毒滴度高，适用于病毒增殖、疫苗生产及抗病du药物筛选实验。

悬浮适应性与代谢特征：在无血清悬浮培养中，细胞聚集体直径稳定在 80-120μm（IPI-FX 无法悬浮生长），葡萄糖消耗率达 15mmol/10⁹细胞 / 天，乳酸生成率仅为贴壁培养的 60%，pH 缓冲能力强（维持在 7.2-7.4），可在生物反应器中连续培养 14 天（IPI-FX 最长 7 天），为大规模病毒生产提供代谢基础。

病毒受体表达与复制支持：高表达 PRRSV 受体 CD163（阳性率 98%）和硫酸乙酰肝素（阳性率 96%），膜表面 CD163 密度达 6.8×10⁴分子 / 细胞（是 IPI-FX 的 5 倍）；感染 PRRSV 后，病毒复制周期缩短至 18 小时（IPI-FX 为 36 小时），胞内病毒 RNA 拷贝数达 10¹¹ copies/mL（IPI-FX 仅 10⁸ copies/mL），病毒释放效率达 80%（显著高于 IPI-FX 的 40%）。

病毒敏感性谱：对 PRRSV 的感染效率达 99%，病毒滴度稳定在 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL（是 IPI-FX 的 30 倍）；对猪圆环病毒 2 型（PCV2）的支持能力同样优异（滴度 10⁷.² TCID₅₀/mL），但对肠道病毒（如猪流行性腹泻病毒）敏感性低（滴度＜10³ TCID₅₀/mL），与 IPI-FX 的肠道病毒敏感性形成器官特异性差异。

大规模病毒增殖：在 500L 生物反应器中，ST-2014S 细胞密度达 5×10⁶个 /mL 时接种 PRRSV，72 小时后病毒收获量达 5×10¹⁰ TCID₅₀，是传统转瓶培养的 20 倍；采用流加培养模式可实现连续 3 次病毒收获，总滴度提升至 1.8×10¹¹ TCID₅₀，目前国内 70% 的 PRRSV 疫苗使用该细胞系生产。

弱毒疫苗株筛选：利用其对 PRRSV 不同毒株的敏感性差异，可通过病毒滴度比值（强毒 / 弱毒）快速评估减毒效果，该比值在 ST-2014S 中达 200（IPI-FX 仅 30），筛选准确率提升 6 倍，显著缩短疫苗研发周期。

高通量药物筛选模型：建立基于荧光标记 PRRSV 的筛选体系，某核苷类似物在 ST-2014S 细胞中对 PRRSV 的抑制率达 99%，EC₅₀为 0.5μM（IPI-FX 中为 3μM），药物选择性指数（SI）达 120，是理想的抗 PRRSV 候选药物；该结果在仔猪实验中得到验证（病毒载量下降 90%）。

病毒入侵机制解析：通过该细胞系发现 PRRSV 通过 CD163 介导的内吞途径入侵，ST-2014S 细胞的内吞速率是 IPI-FX 的 3 倍，且依赖网格蛋白（敲除后入侵率下降 85%），为靶向入侵的抗病du药物设计提供依据。

抗原制备与标准化：ST-2014S 细胞生产的 PRRSV 抗原纯度达 95%（IPI-FX 为 70%），经灭活后用于 ELISA 试剂盒，检测灵敏度达 1:64000，与猪血清阳性符合率达 98%（IPI-FX 抗原为 85%），被列为 PRRSV 抗体检测的标准抗原。

病毒分离鉴定：对临床病料中的 PRRSV 分离率达 92%（IPI-FX 仅 55%），且 24 小时内即可观察到细胞病变（IPI-FX 需 48 小时），使 PRRSV 确诊时间从 72 小时缩短至 48 小时，显著提升疫情处置效率。

培养基与工艺：使用无血清 CDM4CHO 培养基，添加 4mM 谷an酰胺和 0.1% Pluronic F-68（防止细胞聚集过大），搅拌速率控制在 80-100rpm（5L 反应器），溶氧维持在 50%±5%；与 IPI-FX 的贴壁培养不同，无需包被培养器皿，可直接接种于摇瓶或生物反应器。

传代与放大：当细胞密度达 4×10⁶个 /mL 时，按 1:4 比例稀释传代（无需离心，直接稀释），24 小时存活率超 95%；放大培养采用阶梯式（100mL→500mL→2L→10L），每次放大倍数不超过 5 倍，确保细胞适应环境。

冻存与复苏：采用含 10% DMSO 的无血清培养基，细胞密度 1×10⁷个 /mL，程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮，复苏时 37℃水浴 1 分钟，直接接种于悬浮培养基，48 小时密度可恢复至 3×10⁶个 /mL（存活率＞85%）。

PRRSV 培养优化：细胞密度达 3×10⁶个 /mL 时接种病毒（MOI=0.01），培养温度降至 35℃可使病毒滴度提升 2 倍，72 小时收获时活率仍保持 70% 以上；与 IPI-FX 的贴壁感染不同，悬浮培养可通过取样直接检测病毒滴度，无需消化细胞。

病毒滴度测定：采用终点稀释法，在 96 孔板中培养 ST-2014S 细胞，48 小时后观察 CPE，Reed-Muench 法计算 TCID₅₀，结果变异系数＜5%（IPI-FX 为 12%），适合疫苗生产的质量控制。

优势：

局限性：