CV-1非洲绿猴肾细胞系，成纤维样，贴壁生长，易培养、增殖稳定，对多种病毒敏感，适用于病毒学研究、疫苗开发及基因功能验证，应用广泛。

来源与构建：该细胞系于 1964 年由美国科学家从成年非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）肾脏皮质组织中分离建立，经原代培养与传代驯化后获得永生化特性，“CV-1" 源自 “Cercopithecus aethiops kidney 1" 的缩写，明确标识其物种与组织来源。与原代肾细胞相比，其突破了增殖代次限制，可稳定传代 100 次以上，且保留肾脏上皮细胞向成纤维样细胞转型的形态特征，为后续应用奠定基础。

形态与增殖：体外培养呈典型成纤维样形态，贴壁生长，细胞呈长梭形，排列规则，边界清晰，核质比正常。在 37℃、5% CO₂条件下，增殖稳定，传代周期约 48-72 小时，可适应含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，无需特殊生长因子，传代过程中形态与增殖速率无明显变化，冻存复苏后存活率达 85% 以上，显著优于原代灵长类细胞。

遗传特征：核型为灵长类动物典型的二倍体，染色体数目 60 条（2n=60），长期传代后核型变异率＜5%，遗传背景清晰。其显著特点是内源性逆转录病毒序列整合少，对异源病毒的兼容性高，且细胞膜表面表达多种病毒受体（如 SV40 病毒的 CAR 受体），为病毒入侵与复制提供了适宜的宿主环境。

优势：遗传稳定性优异，长期传代后生物学特性无明显改变，实验结果可重复性强；对多种病毒敏感，适用范围广，减少实验中细胞系更换成本；培养条件简单，贴壁牢固，操作便捷，适合实验室常规操作与工业化生产；作为灵长类细胞，与人类细胞的亲缘关系较近，病毒感染模式更接近人体实际情况，研究结果转化价值高。

局限性：成纤维样形态使其无法wan全模拟肾脏上皮细胞的生理功能，部分肾脏特异性病毒的研究需结合原代上皮细胞；对某些人类病毒（如丙肝病毒）敏感性低，应用范围存在局限；长期培养易出现细胞老化现象，传代超过 150 代后增殖速率明显下降，需定期冻存保种。

培养条件：常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基，添加青mei素 - 链mei素混合液预防污染，37℃、5% CO₂培养箱中生长良好。传代时控制融合度在 70%-80%，采用 0.25% yi酶 - EDTA 消化 2-3 分钟，避免过度消化导致细胞损伤。传代比例建议 1:3-1:5，每 3-4 天传代一次，维持细胞处于对数生长期。

质控与安全：定期通过 STR 鉴定确认细胞身份，排除交叉污染；支原体检测需为阴性，确保实验准确性。冻存时使用含 10% DMSO 的wan全培养基，梯度降温后保存于液氮中，复苏时 37℃水浴快速解冻，离心去除 DMSO 后重悬培养，传代 1 次后即可用于实验。因涉及病毒操作，需根据病毒危害等级在相应生物安全实验室进行，避免生物安全风险。