CaSki人宫颈癌细胞系
CaSki人宫颈癌细胞系于 1977 年从一位 43 岁女性宫颈鳞状细胞癌患者的肿瘤组织分离而来,作为首ge被发现完整整合人ru头瘤病毒 16 型(HPV16)全基因组的细胞系,它为揭开宫颈癌与 HPV 的关联密码奠定了基础,在宫颈癌研究领域具有里程碑意义。
从细胞生物学特性来看,CaSki 细胞呈现典型的上皮样形态,显微镜下多为多边形或不规则形状,细胞间紧密相连,常以簇状形式生长。其最核心的生物学特征在于稳定整合约 600 个拷贝的 HPV16 病毒基因组,持续高表达 E6 和 E7 癌蛋白。E6 蛋白通过与抑癌蛋白 p53 特异性结合,加速其泛素化降解进程,使 p53 降解速率提升约 300%,导致细胞周期检查点失控;E7 蛋白则与视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)结合,释放转录因子 E2F,驱动细胞进入异常增殖状态。数据显示,CaSki 细胞的倍增时间仅为 22 - 24 小时,约是正常宫颈上皮细胞的三分之一。在侵袭转移能力上,Transwell 实验中,CaSki 细胞穿过 Matrigel 基质胶的数量可达正常细胞的 8 - 10 倍;划痕愈合实验测得其伤口闭合速度为 65μm/h。此外,CaSki 细胞在软琼脂培养中,单个细胞克隆形成效率达 35% ,皮下接种免疫缺陷小鼠后,7 - 10 天便能形成明显肿瘤,成瘤率高达 92%,且部分肿瘤会发生肺部转移。
CaSki 细胞的培养操作相对常规。使用含 10% 胎牛血清(FBS)、1% 双抗(青mei素 - 链mei素)的 RPMI 1640 培养基即可满足其生长需求,FBS 中的生长因子能有效支持细胞快速增殖。培养环境控制在 37℃、5% CO₂的恒温培养箱中,当细胞融合度达到 80% - 90% 时,按 1:3 - 1:4 的比例,利用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 进行传代,传代周期约 3 - 4 天。新接种细胞 2 - 4 小时开始贴壁,12 小时内基本完成贴壁。日常培养时,需严格遵循无菌操作规范,每 2 - 3 天更换一次培养液,并通过显微镜密切观察细胞形态,若出现细胞变圆、脱落等现象,需警惕污染或老化问题。
凭借du特的生物学特性,CaSki 细胞系成为宫颈癌研究的 “利器"。在机制探索方面,最新研究发现,miR - 218 可靶向 HPV16 E6 mRNA,抑制 E6 蛋白表达,重新激活 p53 通路诱导细胞凋亡;LncRNA - CASC19 与 E7 蛋白结合后,能增强 Wnt/β - catenin 信号通路活性,促进癌细胞侵袭。在药物研发领域,该细胞系是评估宫颈癌hua疗药物、HPV 靶向药及免yi治疗药物的重要模型。以shun铂为例,其在 CaSki 细胞中的 IC₅₀值为 15μM,能显著抑制细胞增殖;新型 HPV E6/E7 蛋白疫苗在 CaSki 细胞荷瘤小鼠模型中,可使肿瘤体积缩小 60%。此外,基于 CaSki 细胞构建的类器官模型,更真实地模拟了肿瘤微环境,为探索联合治疗策略提供了有力支撑。不过,长期传代可能导致 HPV 基因组拷贝数变异,实验前需通过 PCR 检测 HPV16 DNA 含量、Western blot 分析 E6/E7 蛋白表达等手段进行严格鉴定,以确保实验结果的可靠性。
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