SKHEP1人肝腹水腺癌细胞系
SKHEP1人肝腹水腺癌细胞系源自人体肝腹水腺癌组织,作为ji具代表性的肝癌研究模型,在揭示肝脏恶性肿瘤转移奥秘与开发靶向治疗策略中占据重要地位。于显微镜下观察,SKHEP-1 细胞形态复杂多变,以不规则形、圆形为主,呈现悬浮或半贴壁的特殊生长状态,部分细胞相互聚集形成松散细胞团,细胞边界因形态不规则而模糊不清。其胞质丰富且经染色后呈鲜明嗜酸性,肿胀的线粒体数量较正常肝细胞增加约 3 倍,为癌细胞高强度代谢供能;高度发达的内质网与高尔基体,加速异常蛋白的合成与加工。细胞核大且畸形,核质比例严重失衡,核仁数量可达 2 - 3 个,多核现象频发,异常核分裂象占比超 15%,凸显其恶性肿瘤细胞特质。
SKHEP-1 细胞的生物学特性极为突出。在增殖层面,细胞周期蛋白 Cyclin E 和 CDK2 表达量较正常细胞上调 4 - 5 倍,驱动细胞周期进程紊乱,24 - 36 小时即可完成倍增。PI3K/AKT 通路中,PI3K 催化产生的 PIP3 招募 AKT 至细胞膜并使其磷酸化激活,磷酸化 AKT 进一步抑制促凋亡蛋白 Bad 活性,同时激活 mTORC1 通路,使细胞蛋白合成速率提升 60% ,显著增强细胞存活与增殖能力;MAPK 通路中,RAS 蛋白激活 RAF 激酶,经 MEK 传递磷酸化信号激活 ERK,磷酸化的 ERK 入核后促进 c-Myc、Cyclin D1 等基因转录,加速细胞周期运转。侵袭转移方面,SKHEP-1 细胞分泌的 MMP-9 酶活性是正常肝细胞的 8 - 10 倍,可高效分解胶原蛋白、层粘连蛋白等细胞外基质成分;EMT 过程中,E-cadherin 表达下调 40%,N-cadherin 与 Vimentin 表达上调 50% 以上,赋予细胞间质特性,使其侵袭能力显著增强。此外,该细胞系对shun铂耐药倍数达 3.2,为耐药机制研究提供理想样本。
SKHEP-1 细胞的培养需严格遵循规范流程。选用含 10% 特级胎牛血清的 RPMI 1640 培养基,搭配 1% 青mei素 - 链mei素双抗溶液,为细胞生长营造安全稳定环境。培养箱需恒定维持 37℃温度与 5% CO₂浓度,确保细胞内酸碱平衡与酶活性。当细胞密度达 5×10⁵ - 1×10⁶个 /mL 时,采用离心(1000rpm,5 分钟)后更换新鲜培养液重悬细胞的方式传代,传代比例依细胞状态控制在 1:3 - 1:5 。冻存时,以 90% 胎牛血清与 10% 二甲基亚砜配制冻存液,按程序降温( - 80℃过夜后转入液氮)长期保存。培养期间,每周通过台盼蓝染色检测细胞活力,每月采用 Western blot 分析蛋白表达水平,监测细胞特性稳定性。
在科研应用领域,SKHEP-1 细胞系成果丰硕。2024 年一项研究通过 CRISPR 技术敲除 SKHEP-1 细胞的 PTEN 基因,发现 PI3K/AKT 通路活性进一步增强,癌细胞迁移能力提升 70%,揭示 PTEN 缺失在肝腹水腺癌进展中的关键作用。药物研发方面,新型靶向 AKT 变构抑制剂 AZD5363 在 SKHEP-1 细胞实验中,可使细胞增殖抑制率达 82%,诱导凋亡率提升至 45%;联合使用 PD-1 抑制剂与 MEK 抑制剂,可克服 SKHEP-1 细胞的部分耐药性,为临床联合治疗方案优化提供有力支撑。
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