PK-15猪肾细胞系，上皮样贴壁生长，对猪圆环病毒等敏感，具备稳定增殖能力，适用于病毒分离、疫苗生产及猪源疾病机制研究，应用广泛。

肾脏特异性标志物与转运功能：高表达肾上皮细胞特异性标志物，如细胞角蛋白 19（CK19，阳性率 98%）、钠钾泵 α1 亚基（Na⁺/K⁺-ATPase，阳性率 95%），其 Na⁺/K⁺-ATPase 活性达 12μmol Pi/mg 蛋白 /h（显著高于 PNH/HL-059）；能通过肾小管样结构完成水和电解质转运，模拟肾脏的重吸收功能，与猪肾皮质组织的功能一致性达 85%。

病毒受体广谱表达：表达多种猪源病毒受体，如猪瘟病毒受体 CD46（阳性率 92%）、猪圆环病毒受体硫酸乙酰肝素（阳性率 94%），受体谱覆盖 70% 以上的常见猪源病毒；对 PCV2 的受体结合效率是 PNH/HL-059 的 5 倍，为病毒高效感染提供分子基础。

病毒复制支持能力：对 PCV2 的感染效率达 97%，病毒滴度可达 10⁸.⁰ TCID₅₀/mL（显著高于 PNH/HL-059 的 10⁶.⁵ TCID₅₀/mL）；对猪瘟病毒的复制效率居猪源细胞系前列，48 小时病毒滴度达 10⁷.⁵ TCID₅₀/mL，且能稳定产生典型空斑，是该病毒空斑实验的金标准细胞系。

临床样本检测：作为猪圆环病毒分离的shou选细胞系，PK-15 从临床肾脏样本中的病毒分离率达 93%（PNH/HL-059 仅 55%），且 24 小时内即可观察到典型细胞病变（胞质内包涵体），我国基层兽医实验室广泛将其用于 PCV2 相关疾病的快速确诊。

病毒分型研究：利用其对猪瘟病毒不同亚型的敏感性差异，可通过病毒增殖动力学区分强毒与弱毒株（强毒株滴度是弱毒株的 10 倍），为病毒毒力评估提供直观依据，该方法被 OIE 纳入标准操作程序。

常规疫苗生产：在猪瘟灭活疫苗生产中，PK-15 细胞的病毒产量达 10⁸.² TCID₅₀/mL，单位面积产量是 PNH/HL-059 的 2.5 倍，且生产成本降低 40%（无需专用肝细胞培养基）；全球 80% 以上的猪瘟疫苗采用该细胞系生产，累计应用超 60 年。

疫苗效力检测：作为猪圆环病毒疫苗批签发的标准细胞系，其病毒中和试验结果与仔猪攻毒保护率一致性达 91%，检测成本仅为动物实验的 1/6，且耗时从 28 天缩短至 72 小时，大幅提升疫苗质量控制效率。

病毒致肾损伤模型：通过该细胞系研究 PCV2 对肾脏的损伤机制，发现病毒可诱导肾上皮细胞凋亡（凋亡率达 50%），并抑制 Na⁺/K⁺-ATPase 活性（下降 60%），导致水钠代谢紊乱，与 PCV2 感染仔猪的肾炎病理变化一致性达 90%（PNH/HL-059 模型无法模拟）。

肾毒性药物筛选：建立基于肾脏转运功能的药物毒性评价模型，某抗生素在该模型中显示肾毒性（Na⁺/K⁺-ATPase 活性下降 45%），与仔猪肾脏组织损伤结果的相关性达 88%，显著优于肝细胞系模型。

培养基：MEM 培养基添加 10% 胎牛血清，pH 维持在 7.2-7.4；低成本培养可使用 5% 新生牛血清替代，细胞活性保持 90% 以上，病毒产量下降不超过 8%，适合工业化生产。

传代流程：当细胞融合度达 80% 时，按 1:5 比例接种（高于 PNH/HL-059 的 1:2 比例），离心速度 800rpm，24 小时贴壁率超 95%，操作简便性优于肝细胞系。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 1.5×10⁶个 /mL，-80℃冻存可保存 6 个月（存活率＞90%），液氮保存可达 5 年以上，复苏后 24 小时即可恢复正常增殖。

猪圆环病毒培养：细胞以 2×10⁵个 / 孔接种 24 孔板，培养 24 小时后接种病毒（MOI=0.01），37℃培养 72 小时，通过实时荧光定量 PCR 检测病毒拷贝数（可达 10⁹ copies/mL），结果变异系数＜5%。

空斑实验优化：细胞单层接种 6 孔板，病毒 10 倍系列稀释后吸附 1 小时，覆盖含 1% 琼脂糖的维持液，72 小时后结晶紫染色计数空斑，空斑形成单位（PFU）检测灵敏度达 10⁰.⁸ PFU/mL。

优势：

局限性：