PNH/HL-059猪正常肝细胞系，上皮样贴壁生长，表达肝特异性标志物，具备代谢与解毒功能，对肝嗜性病毒敏感，适用于肝脏疾病、药物代谢及抗病毒研究。

肝脏特异性标志物与代谢酶：高表达肝细胞特异性标志物，如白蛋白（ALB，阳性率 97%）、细胞角蛋白 18（CK18，阳性率 96%），其白蛋白分泌量达 15μg/10⁶细胞 / 天（是 PNTEC/HL-056 细胞的 20 倍）；表达 Ⅰ 相代谢酶 CYP3A4、Ⅱ 相代谢酶 UGT1A1，其中 CYP3A4 活性达 25pmol/min/mg 蛋白（接近在体肝细胞水平），能完成药物从氧化到结合的完整代谢过程。

解毒与合成功能：对氨的清除率达 0.8mmol/10⁶细胞 / 天（显著高于胸腺细胞系），尿素合成量达 12μmol/10⁶细胞 / 天；分泌胆汁酸（含量达 8μg/10⁶细胞 / 天），并通过胆小管样结构形成胆汁排泄通路，模拟肝脏的物质转化与排泄功能。

病毒敏感性谱：对猪 HEV 的感染效率达 96%，感染后 72 小时出现典型细胞病变（细胞气球样变、胞质内包涵体），病毒滴度达 10⁷.² TCID₅₀/mL（是 PNTEC/HL-056 细胞的 12 倍）；因高表达 HEV 受体波形蛋白（vimentin），对肝嗜性病毒的吸附效率显著高于免疫器官来源细胞系，尤其适合肝脏病毒研究。

药物代谢途径解析：通过该细胞系发现猪肝细胞中 CYP3A4 对泰乐菌素的代谢效率是人类肝细胞的 1.5 倍，其代谢产物 M1 的生成量与血药浓度呈正相关（R²=0.93），为兽用药物剂量调整提供代谢依据，研究结果与仔猪体内实验一致性达 90%。

肝损伤模型构建：在黄曲霉毒素 B1（AFB1）处理后，细胞内谷胱gan肽含量下降 60%，丙an酸转氨酶（ALT）释放量上升 3 倍，p53 介导的凋亡通路激活（凋亡率达 45%），模拟黄曲霉毒素致肝损伤的病理过程，其损伤指标与临床病例吻合度达 88%。

猪 HEV 复制机制：利用其肝细胞特性，发现 HEV ORF3 蛋白可与细胞骨架蛋白 actin 结合（结合常数 KD=3.1×10⁻⁹M），促进病毒颗粒释放（释放效率提升 40%），与 HEV 感染仔猪肝脏中病毒粒子的胞外分泌特征高度一致（病毒载量是脾脏的 8 倍），揭示病毒的肝脏靶向传播策略。

病毒与代谢交互作用：猪乙型肝炎病毒（HBV）相关病毒感染该细胞系后，CYP3A4 活性下降 50%，导致药物代谢效率降低，证实病毒可通过干扰肝脏代谢酶影响药物疗效，为肝病并发感染的用药方案提供参考。

药物肝毒性筛选：建立基于代谢组学的高通量筛选模型，某抗生素在该模型中显示肝毒性（ALT 升高 2.5 倍），与仔猪灌胃实验结果一致性达 92%（PNTEC/HL-056 模型仅 60%），被兽药企业列为肝毒性评价shou选模型。

肝靶向疫苗效力评价：在 HEV 疫苗研发中，该细胞系的中和抗体效价与仔猪攻毒保护率一致性达 94%（PNTEC/HL-056 模型仅 58%），能特异性反映疫苗对肝脏的保护效果，被农业部列为肝嗜性病毒疫苗的关键评价工具。

培养基：William's E 培养基添加 10% 胎牛血清、10ng/mL 肝细胞生长因子（HGF），pH 维持在 7.2-7.4；为维持代谢功能，可添加 50μM 烟xian胺，使 CYP3A4 活性提升 30%。

传代流程：当细胞融合度达 70% 时，按 1:2 比例接种（低于 PNTEC/HL-056 的 1:3 比例），离心速度 800rpm，24 小时贴壁率超 90%，避免过度融合（＞80% 会导致胆汁分泌功能下降）。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 2×10⁶个 /mL，程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮，复苏时 37℃水浴 1 分钟，接种后 72 小时更换培养基，存活率可达 85%，需检测白蛋白分泌确认功能稳定。

代谢活性检测：接种细胞至 96 孔板，加入底物睾酮，通过 HPLC 检测 6β- 羟基睾酮生成量，计算 CYP3A4 活性，结果变异系数＜8%。

病毒感染实验：接种猪 HEV（MOI=0.1）后，37℃培养 72 小时，通过 ELISA 检测病毒 ORF2 蛋白，阳性率可达 96%，需设置 PNTEC/HL-056 对照组明确组织特异性差异。

优势：

局限性：