CHO-K1仓鼠卵巢细胞系亚株为上皮样，贴壁生长，遗传稳定，易培养，转染效率高，适用于重组蛋白生产、药物筛选及基因功能研究。

来源与形态：该亚株源自 CHO-K1 细胞系，经单细胞克隆或基因编辑技术筛选获得。体外培养时呈典型上皮样形态，贴壁生长，细胞呈多边形，排列紧密且边界清晰，较母系细胞形态更均一。在 37℃、5% CO₂的培养条件下，增殖稳定，传代周期约 2-3 天，可适应贴壁培养、悬浮培养及无血清培养基体系，高密度培养时细胞状态仍能保持稳定。

遗传特征：核型为非整倍体，染色体数目约 20-22 条，核型稳定性优于母系细胞，基因组背景清晰，无内源性病毒序列。部分亚株通过基因改造，缺失了特定代谢相关基因或引入抗性标记，更便于外源基因的筛选与稳定表达，长期传代后仍能维持目标蛋白的表达稳定性。

优势：遗传稳定性高，实验重复性好，能保证长期研究结果的一致性；蛋白表达效率优异，翻译后修饰能力强，产物活性接近天然蛋白；培养适应性强，可在多种培养体系中生长，易于工业化放大；被国际监管机构认可，是生物药生产的合规细胞系，应用范围广泛。

局限性：部分亚株对特定营养成分有特殊需求，增加了培养成本；长期悬浮培养可能出现细胞聚集体，影响蛋白产量与质量；对于某些结构异常复杂的蛋白，表达量可能较低，需进一步优化培养条件或进行细胞改造。

培养条件：常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基，添加青mei素 - 链mei素预防污染。若用于大规模生产，可采用无血清悬浮培养基，并根据亚株特性调整营养成分。培养过程中需控制细胞密度，贴壁培养时融合度不宜超过 85%，悬浮培养时密度保持在适宜范围，避免过度密集影响细胞状态。

污染防控：需定期检测支原体、细菌等污染，可采用 PCR 或染色法进行监测。冻存时使用含 10% DMSO 的冻存液，在液氮中长期保存，复苏时 37℃水浴快速解冻，离心去除 DMSO 以减少细胞损伤，复苏后建议传代 1-2 次，待细胞状态稳定后再用于实验。