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来源与形态:该细胞系源自 BHK21 叙利亚仓鼠肾细胞,经单细胞克隆技术筛选得到,“XF-C02" 为其克隆标识,确保细胞群体的遗传一致性。体外培养呈典型上皮样形态,贴壁生长,细胞呈多边形,轮廓清晰,排列较母系细胞更疏松,便于病毒感染时的扩散。在 37℃、5% CO₂条件下,增殖稳健,传代周期约 20-26 小时,可适应 MEM、DMEM 等多种培养基,兼容 10% 胎牛血清或无血清体系,高密度培养(细胞密度达 2.5×10⁶个 /mL)时仍能保持 85% 以上活性,适合多样化培养需求。
遗传特征:核型为近二倍体,染色体数目与叙利亚仓鼠正常核型一致,长期传代(>60 代)后核型变异率<3%,遗传稳定性优于多数 BHK21 亚株。其显著特点是细胞膜表面病毒受体表达广谱,且内吞途径活跃,能为不同科属病毒提供适宜的复制微环境,尤其对包膜病毒的吸附效率突出。
多病毒共培养与交叉反应研究
疫苗生产与工艺优化
病毒载体构建与基因递送研究
优势:病毒适应谱广,可支持 10 余种常见动物病毒的高效复制,减少实验中细胞系的更换成本;培养耐受性强,对培养基成分波动、pH 变化的适应范围更广,降低规模化生产的工艺控制难度;遗传稳定性优异,长期传代后病毒敏感性衰减缓慢,适合长期实验项目;被多国药监部门认可用于疫苗生产, regulatory 兼容性好。
局限性:部分病毒的复制效率略低于专门优化的亚株(如对狂犬病病毒的滴度稍逊于 C13 亚株);贴壁依赖性较强,悬浮驯化需更长时间(通常 2-3 周);无血清培养时细胞形态易发生轻微改变,需针对性优化营养配方。
培养条件:基础培养基推荐含 10% 胎牛血清的 MEM,添加丙酮酸以增强代谢活性,同时加入抑菌成分预防污染。传代时融合度控制在 60%-75%,避免过度密集导致细胞间连接过强,影响病毒扩散。病毒培养阶段可调整血清浓度至 2%-5%,平衡细胞活性与病毒释放效率。
污染防控:定期通过荧光染色检测支原体,每 20 代进行 STR 鉴定确保遗传纯度;冻存液采用含 10% DMSO 的wan全培养基,液氮保存可维持活性 6 年以上,复苏时 37℃水浴快速解冻,传代 2 次后再用于病毒实验,确保细胞功能稳定。
BHK21-XF-C02 细胞系的独du特jia值在于其功能的广谱性与稳定性,为多病毒研究与复杂生产工艺提供了可靠工具。在基础研究领域,其助力阐明不同病毒的复制差异机制,为跨病毒科比较研究提供标准化平台;在应用领域,其灵活的培养适应性降低了疫苗生产的工艺门槛,尤其适合中小型生物制品企业的技术转化。随着培养工艺的优化(如微载体悬浮培养),该细胞系的应用场景将进一步拓展,持续为生物制药领域提供支撑。
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