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来源与形态:BHK-21 细胞于 1961 年首ci从 1 日龄叙利亚仓鼠的肾脏组织中分离获得,经传代筛选后形成稳定细胞系。体外培养时呈成纤维样形态,贴壁生长,细胞呈长梭形或星形,排列疏松,具有良好的延展性。在 37℃、5% CO₂的恒温培养环境中,增殖速度快,传代周期约 1-2 天,可长期传代且保持稳定活性,同时支持贴壁培养向悬浮培养的驯化,适应规模化生产需求。
遗传特征:该细胞系为永生细胞系,核型呈非整倍体,染色体数目约 44-46 条,核型稳定且无内源性病毒污染。其基因组背景清晰,对外源基因的容纳能力较强,转染后可高效表达目标产物。此外,细胞对多种营养成分的需求简单,无需复杂的生长因子补充,这一特性使其在基础研究与工业生产中均易于操作。
病毒培养与疫苗生产
基因表达与重组蛋白研究
病毒学基础研究
优势:培养条件简单,对培养基成分要求低,可适应含血清或无血清培养体系;病毒敏感性高,能支持多种病毒的完整复制周期,且病毒增殖效率远超其他细胞系;增殖速度快,可通过悬浮培养实现规模化生产,满足工业化需求;细胞遗传稳定性强,长期传代后仍保持一致的生物学特性,实验重复性好,被世界卫生组织(WHO)推荐为疫苗生产的标准细胞系之一。
局限性:作为动物细胞系,其对部分人类病毒(如肝炎病毒)的敏感性较低,应用范围存在一定限制;长期传代可能导致细胞形态变异或病毒敏感性下降,需通过定期冻存原始细胞株来维持稳定性;悬浮培养时易出现细胞聚集体,可能影响病毒或蛋白的均一性生产。
培养条件:常规使用含 10% 胎牛血清的 MEM 或 DMEM 培养基,添加青mei素 - 链mei素混合液抑制细菌污染。若用于大规模病毒培养,可采用旋转瓶或生物反应器进行悬浮培养,配合无血清培养基减少外源蛋白干扰,便于后续纯化。培养过程中需控制细胞密度(贴壁培养融合度不超过 80%),避免过度密集导致细胞形态改变或增殖停滞。
污染防控:贴壁细胞易受支原体、真菌污染,需定期通过 PCR 或荧光染色法检测;冻存时需加入 10% 二甲基亚砜(DMSO)作为保护剂,在液氮中可长期保存,复苏时 37℃水浴快速解冻,离心去除 DMSO 以减少细胞损伤。
以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。
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