LS 174T人结直肠腺癌细胞系
LS 174T人结直肠腺癌细胞系源自男性结肠腺癌患者的肿瘤组织，于 20 世纪 70 年代初被成功建立。在显微镜下观察，其细胞呈现典型的上皮样形态，细胞相互连接，形成紧密的单层或簇状结构，细胞大小和形态存在一定差异，这种异质性与人体结直肠腺癌肿瘤组织的细胞特征高度相似。其核型为超二倍体，存在多个染色体畸变，同时携带多种关键基因突变，例如 KRAS 基因突变、p53 通路相关基因缺失等，这些遗传特征不仅赋予细胞恶性增殖的能力，也为肿瘤研究提供了丰富的靶点。
HCT - 15 细胞的培养需特定且精细的条件。常用 RPMI - 1640 培养基，添加 10% 优质胎牛血清和 1% 双抗，以满足细胞生长所需营养，维持无菌环境。其中，胎牛血清富含细胞生长必需的生长因子、激素、结合蛋白等物质，能有效促进细胞贴壁和增殖；双抗则防止细菌和真菌污染，保障细胞健康生长。培养环境为 37℃、5% 二氧化碳与 95% 空气的混合气体，湿度保持在 70% - 80%。37℃模拟人体体温，5% 二氧化碳可维持培养基的 pH 稳定，适宜的湿度避免培养基过快蒸发。
细胞贴壁生长，当汇合度达 80% - 90% 时需传代。传代使用 0.25％（w/v）胰dan白酶 - 0.53mM EDTA 消化，由于细胞贴壁较紧，消化时间相对较长，约 1 - 2 分钟。在消化过程中，需在显微镜下密切观察细胞形态变化，当细胞变圆、间隙增大时，及时终止消化，避免过度消化损伤细胞。若出现消化困难的情况，可适当提高胰dan白酶浓度或延长消化时间，但需格外注意观察。消化后，需迅速加入含血清的培养基中和胰dan白酶活性，防止残留胰dan白酶继续作用。传代比例一般为 1:2 - 1:4 ，传代后需定期更换培养基，保证细胞有充足的营养供应。冻存时，冻存液采用 90% 胎牛血清加 10% 二甲基亚砜，按 4℃ 10 分钟、-20℃ 2 小时、-80℃过夜后转至液氮的程序保存，每一步降温都能减少细胞内冰晶形成，保护细胞活性。值得注意的是，复苏细胞时，需将冻存管迅速放入 37℃水浴中快速解冻，以减少低温对细胞的损伤。若复苏后细胞活力不佳，可尝试降低传代密度，给予细胞更宽松的生长环境。
在科学研究中，HCT - 15 细胞系应用广泛。利用该细胞系构建的耐药模型，如 HCT - 15/5FU 细胞系，是研究氟尿*啶耐药机制的重要工具。研究发现，HCT - 15/5FU 细胞的耐药涉及胸苷酸合成酶上调、二氢嘧啶脱氢酶活性增强、药物外排与解毒系统激活等多个方面。通过对 HCT - 15 细胞的研究，不仅能深入探索肿瘤发生发展机制，还能进行抗癌药物筛选、评估药物疗效。例如，在前沿研究中，科研团队将新型免疫检查点抑制剂与传统hua疗药物联合作用于 HCT - 15 细胞，观察到两者协同作用显著增强了对癌细胞的杀伤效果，为结直肠癌的免疫 - hua疗联合治疗策略提供了理论依据。还有研究团队运用 HCT - 15 细胞测试新型纳米靶向药物，该药物能够精准识别并作用于癌细胞表面的特定受体，相比传统药物，其对 HCT - 15 细胞的抑制效果更好且副作用更小。此外，通过基因编辑技术对 HCT - 15 细胞的特定基因进行敲除或过表达，可探究基因在肿瘤发展中的功能，从而发现新的治疗靶点，为结直肠癌的临床治疗提供更多潜在方向。
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