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人肺动脉平滑肌细胞 3110
产品型号:
简要描述:

人肺动脉平滑肌细胞 3110是来源于人肺动脉组织的原代细胞。经α-SMA免疫荧光鉴定阳性,纯度高于90%。作为研究肺动脉高压、血管重塑等疾病的体外细胞模型,是心血管研究的重要工具。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

人肺动脉平滑肌细胞 3110

人肺动脉平滑肌细胞 3110源于健康人肺动脉血管中膜组织,采用酶解法(yi酶-胶原酶联合消化)分离获得单细胞悬液,经差速贴壁法纯化、筛选后,进行传代培养建立稳定细胞系,严格遵循原代平滑肌细胞分离培养的标准操作程序,全程严格控制无菌环境,最da程度保留其体内生理功能及形态特征。该细胞系经严格质量检测,细胞纯度≥98%,平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)等特异性标志物表达阳性,支原体、细菌、真菌及杂细胞检测均为阴性,无外源病毒污染,符合细胞库基本质量要求;通过免疫荧光染色、Western blot验证,其形态及功能与体内肺动脉平滑肌细胞高度一致,可精准模拟体内肺动脉血管壁平滑肌细胞的生理状态,可直接用于各类肺部血管相关科研实验,确保实验结果的准确性与可靠性。该细胞为典型贴壁生长细胞,在适宜培养条件下呈梭形或长梭形,胞体舒展,排列呈束状或漩涡状,传代过程中可稳定保持平滑肌细胞的固有形态及生理功能,为肺部血管疾病相关研究提供稳定、可靠的细胞来源。

细胞核心特性

该细胞既具备原代平滑肌细胞的固有生物学特性,又具有肺动脉平滑肌细胞的专属功能优势,核心特性突出,适配肺部血管疾病科研及产业化应用需求:一是细胞特异性强,高表达肺动脉平滑肌细胞特异性标志物(α-SMA、SM-MHC),不表达内皮细胞、成纤维细胞等杂细胞标志物,可精准区分于其他组织来源的平滑肌细胞,能特异性用于肺动脉相关生理病理研究,避免杂细胞干扰实验结果;二是功能完整,具备典型的平滑肌细胞生理功能,可响应血管收缩剂(如去甲shen上腺素)、舒张剂(如一氧化氮)的调控,实现收缩与舒张,同时可正常进行增殖、迁移及表型转化,能模拟体内肺动脉血管壁的张力调节及重塑过程,契合肺部血管疾病研究需求;三是生长特性良好,呈贴壁生长,贴壁率≥95%,需在包被明胶或多聚赖氨酸的培养器皿中生长,增殖能力适中,倍增时间约72-96小时,可稳定传代8-10代,形态均一,无明显衰老或凋亡现象,生长习性贴合原代肺动脉平滑肌细胞常规培养要求;四是培养适配性强,适配常规原代平滑肌细胞培养条件,无需复杂实验设备,普通实验室在无菌条件下即可完成培养、传代及冻存操作,细胞对营养条件要求温和,适配平滑肌细胞专用培养基,降低实验门槛;五是质量可控,每批细胞均提供完整的质量检测报告,包含细胞纯度、活性、污染检测及特异性标志物鉴定等内容,同时可提供细胞形态学相关数据,满足科研实验的质量要求,适配细胞相关资料建档保存需求;六是应用广泛,可适配细胞增殖、凋亡、迁移、表型转化等多种实验方法,同时可用于血管支架接种培养等相关实验,为肺部血管疾病机制研究、药物筛选及组织工程研究提供quan方位支撑,可结合流动培养生物反应器模拟体内生理环境开展相关实验研究。

细胞培养与传代方法

该细胞为贴壁生长原代平滑肌细胞,培养需遵循原代平滑肌细胞常规培养规范,重点兼顾其原代细胞脆弱、易损伤的特性,同时严格遵循无菌操作原则,避免细胞形态异常或功能丧失,具体操作方法如下:一是培养体系,推荐使用平滑肌细胞专用基础培养基,添加10%-15%胎牛血清、适量双抗(青mei素+链mei素)及平滑肌细胞生长因子(PDGF-BB),置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养,培养基需提前预热至37℃,避免温度骤变损伤细胞,同时定期更换培养基(每3-4天更换一次),保持培养基营养充足,减少代谢废物积累,契合原代平滑肌细胞体外培养的标准要求,选择优质血清可进一步提升细胞生长状态;二是细胞复苏,将冻存细胞从液氮中取出,快速放入37℃水浴中1-2分钟解冻,解冻后立即用70%酒精消毒冻存管表面,无菌操作将细胞悬液转移至离心管,800r/min离心5分钟,弃去上清液,加入预热的wan全培养基重悬细胞,轻轻吹打至单细胞悬液(吹打动作需极轻柔,避免损伤细胞),接种至预先包被明胶的培养瓶/培养皿中培养,复苏成活率≥85%,复苏后48小时内细胞可完成贴壁并开始伸展;三是细胞传代,当细胞融合度达到70%-80%时进行传代(原代平滑肌细胞不宜过度融合,避免影响细胞活性),传代前用PBS轻轻润洗细胞表面2次,去除残留培养基,加入适量yi酶-EDTA消化液,37℃孵育3-5分钟,倒置显微镜下观察到细胞形态变圆、间隙增大时,立即加入wan全培养基终止消化,用弯头滴管轻轻吹打细胞表面,使细胞脱落并分散为单细胞悬液,离心后重悬细胞,传代比例建议为1:2-1:3,接种至新的包被培养瓶中继续培养,每5-7天传代一次,传代过程中吹打动作轻柔,避免剧烈震荡导致细胞损伤,同时控制消化时间,避免过度消化影响细胞贴壁能力;四是培养注意事项,培养器皿需提前用明胶或多聚赖氨酸包被(37℃孵育1-2小时),提升细胞贴壁效果;培养过程中避免频繁移动培养器皿,防止细胞脱落;严格控制培养环境的温度、湿度及CO₂浓度,避免环境波动影响细胞活性;若用于血管支架相关实验,可将细胞悬液注入支架内腔,静置后滚动支架确保细胞均匀分布,先静态培养1天使细胞贴附伸展,再根据实验需求采用流动培养生物反应器进行后续培养;定期观察细胞形态,若出现细胞胞体皱缩、贴壁不牢、漂浮细胞增多等情况,及时调整培养条件或添加生长因子;培养环境需严格遵循无菌要求,开放操作需在百级生物安全柜内进行,避免细胞污染,无菌意识是细胞培养成功的关键。

适用实验场景

该细胞专为肺部血管疾病相关研究设计,贴合其肺动脉平滑肌细胞的生理功能及特性,适配科研、药物研发、教学及组织工程等多种场景,核心应用围绕肺动脉生理病理、肺部血管疾病及药物研发展开,具体包括:一是肺动脉生理功能研究,利用该细胞探究肺动脉平滑肌细胞的收缩与舒张机制、血管张力调节规律,分析其在肺部血液循环中的作用,助力肺部生理学、血管生物学基础研究,同时可探究不同氧气浓度等环境因素对细胞增殖的影响;二是肺部血管疾病研究,用于肺动脉高压、肺心病、肺栓塞、肺部血管重塑等疾病的发病机制研究,这类疾病常伴随肺动脉平滑肌细胞异常增殖、迁移及表型转化,可通过该细胞模拟疾病病理状态,探究细胞异常调控机制,为疾病诊断及治疗提供实验依据;三是血管损伤与修复研究,模拟肺部血管损伤、缺血等病理状态下肺动脉平滑肌细胞的损伤过程,研究细胞保护及修复机制,筛选促进细胞正常增殖、抑制异常重塑的候选物质,为肺部血管损伤修复提供实验支撑;四是药物研发与筛选,用于抗肺动脉高压药物、血管扩张药物、抗血管重塑药物的筛选及疗效评估,检测药物对肺动脉平滑肌细胞增殖、凋亡、迁移及收缩功能的调控作用,为药物研发提供可靠的细胞模型;五是基础实验与教学应用,可用于原代细胞分离、培养技术的教学,以及平滑肌细胞形态观察、免疫荧光染色、Western blot检测等基础实验,同时可用于细胞增殖、凋亡相关实验,助力血管生物学、病理学教学与基础研究;六是组织工程研究,可作为种子细胞参与肺部血管组织工程支架构建,先静态培养使细胞贴附伸展,再通过流动培养生物反应器模拟体内生理剪切力和压力条件培养,模拟肺动脉血管微环境,为肺部血管组织修复提供新的技术思路,同时可用于探究细胞与支架材料的相互作用。
备注:(具体细胞培养、传代、检测及实验操作方法请参考产品说明书)

储存与注意事项

储存方面,该细胞冻存状态下需置于液氮中长期保存,有效期为12个月,冻存液推荐使用含10%DMSO+20%胎牛血清的平滑肌细胞专用培养基,采用梯度降温法冻存(4℃预冷30分钟,-80℃过夜,再转入液氮),避免细胞损伤;短期储存可置于-80℃超低温冰箱,保存时间不超过1个月,避免反复冻融,防止细胞活性下降、形态异常及功能丧失,同时需进行储存过程中的稳定性检测,确保细胞活性、纯度等指标符合要求,契合细胞库储存相关规范。注意事项包括:产品仅供科研使用,不用于临床治疗诊断;细胞复苏时需快速解冻,避免反复冻融,解冻后及时接种,吹打动作极轻柔,防止损伤细胞,复苏后48小时内避免移动培养器皿,确保细胞正常贴壁及伸展;培养过程中需严格遵循无菌操作原则,禁止共用培养耗材,开放操作需在消毒后的生物安全柜内进行,避免细胞污染,若发生污染需及时处理,不可继续培养;培养过程中避免剧烈震荡、温度骤变,防止细胞脱落或凋亡;若开展支架接种相关实验,需确保支架处理无菌,细胞接种均匀,严格遵循静态培养与流动培养的操作规范

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