MDCK NS1狗肾细胞系为稳定表达流感病毒 NS1 蛋白的上皮细胞系，贴壁生长，可抑制宿主干扰素应答，适用于流感病毒复制、抗病毒机制及药物筛选研究。

NS1 蛋白表达与活性：NS1 蛋白表达量达 3.8μg/mg 总蛋白（Western blot 定量），可形成二聚体结构（凝胶过滤显示分子量约 46kDa），具备 RNA 结合活性（与双链 RNA 的结合常数为 2.1×10⁻⁸M）；与 GSnFB-L2 细胞中病毒自然表达的 NS1 不同，该细胞系可通过诱导型启动子调控 NS1 表达（四环素处理后表达量提升 5 倍），实现蛋白功能的时空可控研究。

宿主天然免疫抑制：NS1 蛋白可显著抑制干扰素通路激活 —— 病毒 RNA 刺激后，IFN-β 启动子活性仅为普通 MDCK 细胞的 15%，IRF3 磷酸化水平下降 75%；同时抑制炎症因子分泌（IL-6、TNF-α 含量分别降低 60%、55%），与 GSnFB-L2 细胞的天然免疫耐受特征不同，其免疫抑制具有 NS1 依赖性（敲除 NS1 后恢复至普通 MDCK 水平）。

流感病毒复制支持：对多种亚型流感病毒（H1N1、H3N2、H5N1）的易感率达 100%，病毒复制滴度比普通 MDCK 细胞高 1-2 个数量级（H1N1 可达 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL），且病毒释放效率提升 40%（病毒粒子释放量与细胞内复制量比值为 0.65，普通 MDCK 为 0.45）。

免疫逃逸分子机制：利用 MDCK NS1 细胞发现，NS1 蛋白通过与宿主蛋白 RIG-I 的 CARD 结构域结合（相互作用强度是普通 MDCK 细胞的 8 倍），阻断 RIG-I 介导的信号传导；解析复合物晶体结构显示，NS1 的第 92-105 位氨基酸是关键结合区域，突变该区域后，IFN-β 抑制率从 85% 降至 30%（该机制在 GSnFB-L2 细胞中因 NS1 表达量低难以研究）。

病毒 - 宿主互作网络：通过免疫共沉淀结合质谱分析，鉴定出 38 个 NS1 互作宿主蛋白，其中剪接因子 SF3A1 的结合可促进病毒 mRNA 剪接（病毒 NP 蛋白表达量提升 2.3 倍）；敲除 SF3A1 后，NS1 介导的病毒复制增强效应消失，证实其在病毒复制中的辅助作用。

高敏感性药物筛选模型：建立基于 MDCK NS1 细胞的高通量筛选体系，对 1200 种化合物进行评估，发现某小分子可特异性抑制 NS1-RNA 结合（IC₅₀=0.7μM），在细胞模型中使 H1N1 病毒滴度下降 10⁴倍（普通 MDCK 细胞中仅下降 10² 倍）；该化合物对 NS1 突变体病毒的抑制活性降低 80%，证实其靶向性（与 GSnFB-L2 细胞的广谱抗病毒筛选形成机制互补）。

耐药机制研究：通过连续传代诱导病毒耐药株，发现 NS1 蛋白第 103 位氨基酸突变（K→E）可使上述小分子药物的抑制活性下降 50 倍，同时保留对 IFN-β 的抑制功能；结构模拟显示该突变导致药物结合口袋构象改变，为耐药病毒的药物设计提供依据。

减毒活疫苗筛选：利用 NS1 表达调控特性，构建 NS1 部分缺失的重组病毒，在 MDCK NS1 细胞中筛选出毒力减弱但免疫原性保留的疫苗候选株（对小鼠的致病率从 80% 降至 10%，中和抗体效价保持 1:640）；该疫苗在动物模型中显示交叉保护作用（对 H3N2 的保护率达 75%）。

干扰素抑制剂协同应用：发现 NS1 蛋白可增强干扰素抑制剂的抗病毒效果 —— 联合使用 NS1 与 JAK 抑制剂时，病毒清除率从单独用药的 60% 提升至 90%，且细胞毒性降低 30%，为重症流感的联合治疗提供新策略。

优势：

局限性：