ZEBDanio rerio ZEB斑马鱼胚胎细胞系
在生命科学研究领域,斑马鱼凭借与人类基因高度同源、繁殖速度快、胚胎透明等优势,成为发育生物学、遗传学及药物研发的重要模式生物。ZEBDanio rerio ZEB斑马鱼胚胎细胞系的建立,为体外研究斑马鱼胚胎发育机制、基因功能及疾病模型提供了稳定的细胞平台。
斑马鱼(Danio rerio)是一种小型热带淡水鱼,其胚胎在体外发育且通体透明,便于实时观察细胞分化和器官形成过程。胚胎细胞作为个体发育的起始细胞,具有多向分化潜能,蕴含着生命发育的核心信息。ZEBD 细胞系源自斑马鱼早期胚胎组织,保留了胚胎细胞的增殖活性和分化潜力,为解析胚胎发育的分子机制提供了理想材料。
该细胞系的建立经过精细的无菌操作流程。选取受精后 24 小时的斑马鱼胚胎,在无菌环境下去除卵膜,用含抗菌成分的缓冲液冲洗 3-4 次以清除卵黄物质。将胚胎组zhi剪碎后,加入细胞分散液处理 15-20 分钟,收集单细胞悬液并经滤网过滤,离心纯化后,用含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养液重悬,置于 28℃、5% CO₂培养箱中进行原代培养。初期每 1-2 天更换培养液,待细胞汇合度达 80% 时进行传代,目前已稳定传代至 60 代以上,细胞活力始终保持在 90% 以上。
ZEBD 细胞系呈现典型的上皮样形态,细胞呈多边形,紧密排列成单层,具有较强的贴壁生长能力。在生长特性研究中发现,其最适培养温度为 28℃,相较于哺乳动物细胞培养温度更接近斑马鱼生理环境;当胎牛血清浓度为 12% 时,细胞群体倍增时间最短,约为 36 小时。传代至 40 代后,细胞形态和增殖速率无明显变化,核型分析显示其染色体数目稳定,表明该细胞系具有良好的遗传稳定性。
在功能特性方面,ZEBD 细胞系展现出显著的胚胎细胞特性。通过诱导实验发现,在特定细胞因子作用下,该细胞可分化为神经样细胞、心肌样细胞等多种细胞类型,为研究细胞分化的调控网络提供了体外模型。同时,该细胞系对外源基因转染效率较高,转染后绿色荧光蛋白表达均匀且持续时间长,适用于基因过表达或敲除实验,为解析特定基因在胚胎发育中的作用机制提供了有力工具。
ZEBD 细胞系在多个研究领域具有广泛应用。在发育生物学研究中,通过检测细胞中发育相关基因的表达变化,揭示了 Wnt、BMP 等信号通路在胚胎轴形成中的调控作用;在药物筛选方面,利用该细胞系建立了心脏毒性评估模型,可快速检测药物对胚胎心肌细胞的影响,为新药研发提供早期安全评价依据;在疾病模型研究中,通过诱导细胞发生特定基因突变,成功模拟了人类先天性心脏病的细胞表型,为疾病机制研究和治疗靶点发现奠定基础。
作为稳定可靠的斑马鱼胚胎细胞模型,ZEBDanio rerio ZEB 细胞系不仅推动了斑马鱼基础研究的深入开展,更为人类疾病的体外模拟和药物研发提供了高效平台,在生命科学研究中具有不可替代的价值。
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