TiBC罗非鱼脑细胞系
TiBC罗非鱼脑细胞系作为针对罗非鱼神经系统研究的重要细胞模型,在水产养殖与鱼类生物学领域具有不可替代的价值。它的建立为探索罗非鱼神经系统功能、病毒感染机制及神经相关疾病研究提供了稳定的体外模型,推动了相关科研与应用的发展。
罗非鱼是热带亚热带地区广泛养殖的淡水鱼类,具有生长迅速、耐低氧、适应性强等特点,是全球水产养殖的支柱品种之一。脑部作为鱼类神经系统的核心,负责调控摄食、繁殖、应激反应等重要生命活动,而脑细胞的正常功能是维持这些生理过程的基础。TiBC 细胞系源自罗非鱼脑组织,尤其富集星形胶质细胞,这类细胞在神经支持、营养供应及免疫防御中发挥关键作用,为研究罗非鱼神经生物学特性提供了理想材料。
TiBC 罗非鱼脑细胞系的建立经过严格的无菌操作流程。选取健康成年罗非鱼,经全身消毒后,在超净工作台中解剖分离脑组织,去除脑膜及血管等结缔组织。将脑组zhi剪碎成 1mm³ 左右的小块,用含抗菌成分的缓冲液冲洗 4-5 次以去除血细胞,随后加入细胞分散液处理 25-30 分钟,使细胞充分分散。收集细胞悬液经 70μm 滤网过滤,1000r/min 离心 5 分钟后,用含 15% 胎牛血清的 L-15 培养液重悬细胞,接种于培养瓶中,置于 26℃恒温培养箱进行原代培养。初期每 2 天更换一半培养液,待细胞汇合度达 70%-80% 时进行传代,目前已稳定传代至 45 代以上,细胞活力保持在 85% 以上。
该细胞系呈现典型的星形胶质细胞形态特征,细胞体呈多角形或星形,具有多个细长突起,常相互连接形成网状结构,贴壁生长能力强。生长特性研究表明,TiBC 细胞在 L-15 培养液中生长状态优良,相较于 DMEM 等培养基,细胞增殖速度提高约 20%;最适培养温度为 26-28℃,与罗非鱼的生理温度一致;当胎牛血清浓度为 10%-12% 时,细胞群体倍增时间最短,约为 60 小时。传代至 30 代后,细胞形态与增殖速率无明显变化,核型分析显示染色体数目稳定,表明其具有良好的遗传稳定性。
在功能特性方面,TiBC 细胞系展现出显著的神经细胞特征。免疫荧光检测显示,细胞高表达星形胶质细胞标志物 GFAP(胶质纤维酸性蛋白),进一步证实了其细胞类型属性。该细胞系对罗非鱼神经坏死病毒表现出高度敏感性,感染后 24 小时即可观察到细胞变圆、聚集、脱落等典型病变,且病毒滴度随时间显著升高,为研究该病毒的侵染机制与抗病du药物筛选提供了高效模型。此外,TiBC 细胞的外源基因转染效率可达 35% 以上,通过转染荧光报告基因,可清晰观察到基因在神经细胞中的表达与定位,适用于神经相关基因的功能研究。
TiBC 罗非鱼脑细胞系在多个研究领域具有重要应用。在神经生理学研究中,通过检测细胞内钙离子浓度变化,揭示了罗非鱼应对温度胁迫时的神经信号传导机制;在病毒学研究中,利用该细胞系成功分离出罗非鱼新型疱疹病毒,并明确了病毒复制的关键阶段;在药物研发方面,建立了基于细胞活性的神经保护药物筛选模型,已筛选出 3 种具有潜在神经保护作用的天然化合物。
作为首ge稳定建立的罗非鱼脑细胞系,TiBC 不仅填bu了罗非鱼神经细胞模型的空白,更为鱼类神经科学研究提供了重要工具,助力推动罗非鱼健康养殖与水产动物神经生物学领域的发展。
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