RNLEC/HL-039大鼠正常肺上皮细胞系
RNLEC/HL-039大鼠正常肺上皮细胞系作为源自大鼠肺组织的上皮细胞模型，因保留肺上皮细胞的气体交换辅助功能、屏障保护作用及损伤应答特性，在肺部生理功能调控、肺损伤机制及呼吸系统疾病研究中具有重要价值，成为探究肺上皮细胞生物学特性及相关疾病的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠肺实质的支气管及肺泡上皮组织，经原代培养和纯化获得。细胞形态呈典型上皮样，多为立方形或多边形，胞体大小均匀（直径约 18-22μm），胞质丰富且呈嗜酸性，可见大量的线粒体和内质网，约 15% 细胞可见细小的胞质突起，细胞核呈圆形或椭圆形，位于细胞中央，核仁清晰。生长方式为贴壁生长，呈单层铺路石样排列，具有明显的接触抑制现象，传代后 24 小时贴壁率达 94%。核心参数符合正常肺上皮细胞特征：倍增时间约 62 小时，连续传代 20 次后仍保持稳定的生物学特性；表面标志物表达du特，细胞角蛋白 18（CK18）阳性率达 95%，肺上皮特异性标志物甲状腺转录因子 - 1（TTF-1）阳性率 93%，紧密连接蛋白 occludin 阳性率 91%；具有正常的二倍体核型（染色体数 42 条），无染色体畸变；屏障功能显著，跨上皮电阻（TEER）值达 380Ω・cm²，对氧气的通透性达适宜生理范围；分泌功能活跃，表面活性物质相关蛋白 A（SP-A）基础分泌量达 30ng/mL，黏液蛋白（MUC5B）分泌量达 22ng/mL；无微生物污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在肺部气体交换辅助研究中，RNLEC/HL-039 细胞经低氧（5% 氧气）处理 48 小时后，缺氧诱导因子 - 1α（HIF-1α）表达量增加 4.2 倍，血管内皮生长因子（VEGF）分泌量提升 55%，可模拟缺氧状态下肺上皮细胞对血管生成的调控过程，为解析肺部气体交换的辅助调节机制提供理想模型。
肺损伤修复研究方面，该细胞经脂多糖（LPS）处理后，炎症因子 IL-6 分泌量增加 4.8 倍，乳酸脱氢酶（LDH）释放量提升 60%，细胞凋亡率达 38%；而经肺表面活性物质处理后，细胞存活率提升 50%，炎症因子水平下降 55%，可模拟细菌性肺炎引起的肺上皮损伤及修复过程，适用于探究肺损伤修复的分子机制。
呼吸系统疾病研究领域，该细胞经二氧化硅颗粒（50μg/mL）处理后，氧化应激水平提升 65%，转化生长因子 -β1（TGF-β1）表达量增加 4.5 倍，细胞外基质蛋白分泌量提升 40%，能很好地模拟尘肺形成过程中的肺上皮细胞损伤，为探究尘肺等间质性肺病的发病机制提供实验基础。此外，该细胞与肺巨噬细胞共培养时，巨噬细胞的吞噬活性提升 45%，炎症因子 TNF-α 分泌量增加 3.2 倍，可用于探究肺上皮细胞与免疫细胞相互作用在肺部炎症中的调控机制。
培养与保存规范：推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基，添加 2mM 谷an酰胺、0.1ng/mL 表皮生长因子（EGF）及 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2-3 天更换一次，以维持细胞的正常功能。传代时，用 PBS 冲洗细胞 2 次，加入专用上皮细胞解离液，37℃孵育 8-10 分钟，待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落，传代比例为 1:2-1:3，每 5-6 天传代一次，避免过度传代导致功能下降。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，细胞浓度调整为 3×10⁶个 /ml，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏存活率达 86% 以上，3-4 代内可恢复正常的生长和功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物且排列规则后进行实验。该细胞系仅限科研使用，操作时需避免频繁更换培养条件，以防影响其屏障功能和分泌活性。
RNLEC/HL-039 大鼠正常肺上皮细胞系以其稳定的肺上皮特性、完整的生理功能及典型的损伤应答能力，在肺部生物学研究与呼吸系统疾病机制探索中发挥着重要作用，为揭示肺部疾病的发病机制和开发肺保护药物提供了可靠的细胞模型。
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