RNTEC/HL-040大鼠正常甲状腺上皮细胞系
RNTEC/HL-040大鼠正常甲状腺上皮细胞系作为源自大鼠甲状腺滤泡的上皮细胞模型,因保留甲状腺te有的激素合成功能、碘摄取能力及内分泌调节特性,在甲状腺生理功能解析、甲状腺疾病机制及内分泌调控研究中具有重要价值,成为探究甲状腺滤泡上皮细胞功能及相关疾病的关键实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠甲状腺滤泡组织,经原代培养和纯化获得。细胞形态呈典型上皮样,多为立方形或多边形,胞体大小均匀(直径约 15-18μm),胞质丰富且呈嗜酸性,可见大量的粗面内质网和高尔基体,约 20% 细胞可见细小的胞质突起,细胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞中央,核仁清晰。生长方式为贴壁生长,呈单层滤泡样聚集排列,接触抑制明显,传代后 24 小时贴壁率达 95%。核心参数符合正常甲状腺上皮细胞特征:倍增时间约 72 小时,连续传代 20 次后仍保持稳定的生物学特性;表面标志物表达du特,甲状腺球蛋白(Tg)阳性率达 96%,甲状腺过氧化物酶(TPO)阳性率 94%,促甲状腺素受体(TSHR)阳性率 92%;具有正常的二倍体核型(染色体数 42 条),无染色体畸变;激素合成功能活跃,甲状腺素(T4)基础分泌量达 45ng/mL,三碘甲状腺原氨酸(T3)分泌量达 12ng/mL;碘摄取能力突出,125I 摄取率达 35%,受促甲状腺素(TSH)刺激后摄取率提升至 65%;无微生物污染,细胞纯度达 97%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在甲状腺激素合成机制研究中,RNTEC/HL-040 细胞经促甲状腺素(10mU/mL)处理 48 小时后,甲状腺球蛋白 mRNA 表达量增加 4.2 倍,甲状腺过氧化物酶活性提升 58%,T4 分泌量增加 3.5 倍,可模拟垂体 - 甲状腺轴对激素合成的调控过程,为解析甲状腺激素合成的分子机制提供理想模型。
甲状腺自身免疫疾病研究方面,该细胞经甲状腺自身抗体(抗 Tg 抗体)处理后,细胞凋亡率达 38%,炎症因子 IL-6 分泌量增加 4.8 倍,补体 C3 沉积量提升 60%;而经免疫抑制剂处理后,细胞存活率提升 50%,炎症反应强度下降 55%,可模拟桥本甲状腺炎中的甲状腺上皮损伤过程,适用于探究自身免疫性甲状腺疾病的发病机制。
内分泌紊乱研究领域,该细胞经高碘环境(碘离子 100μmol/L)处理后,钠碘转运体(NIS)表达量下降 55%,碘摄取率降低 60%,T3 分泌量下降 40%,能很好地模拟碘过量引起的甲状腺功能异常,为探究碘代谢紊乱相关甲状腺疾病的发病机制提供实验基础。此外,该细胞与甲状腺间质细胞共培养时,间质细胞的成纤维生长因子(FGF)分泌量增加 3 倍,可用于探究滤泡上皮 - 间质相互作用在甲状腺增生中的调控机制。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培养基,添加 1mU/mL 促甲状腺素(TSH)、5μg/mL 胰岛素及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2 天更换一次,以维持细胞的激素合成功能。传代时,用 PBS 冲洗细胞 2 次,加入专用上皮细胞解离液,37℃孵育 10-12 分钟,待细胞滤泡结构松散后轻轻吹打使细胞脱落,传代比例为 1:2-1:3,每 7-8 天传代一次,避免过度传代导致功能下降。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,细胞浓度调整为 2×10⁶个 /ml,经程序降温(-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存)后,复苏存活率达 85% 以上,3-4 代内可恢复正常的生长和激素分泌功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输,收到细胞后需静置培养 24 小时,更换培养基后观察细胞形态,确认无异常漂浮物且滤泡样结构完整后进行实验。该细胞系仅限科研使用,操作时需避免频繁更换 TSH 浓度,以防影响甲状腺功能稳定性。
RNTEC/HL-040 大鼠正常甲状腺上皮细胞系以其稳定的甲状腺上皮特性、完整的激素合成功能及典型的内分泌应答能力,在甲状腺生物学研究与内分泌疾病机制探索中发挥着重要作用,为揭示甲状腺疾病的发病机制和开发甲状腺疾病治疗药物提供了可靠的细胞模型。
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