MM-S4猕猴皮肤细胞系，成纤维样，贴壁生长，保留皮肤细胞表型，对痘病毒等敏感，适用于皮肤病毒研究、创伤修复机制探索及外用药物筛选。

表型标志物表达：高表达成纤维细胞特异性标志物，如波形蛋白（Vimentin）、成纤维细胞特异性蛋白 1（FSP1），免疫荧光阳性率＞98%；同时分泌 Ⅰ 型和 Ⅲ 型胶原蛋白（比例约 5:1），与人类皮肤成纤维细胞的胶原分泌模式高度一致，每日分泌量达 30μg/10⁶细胞。

病毒敏感性：对猴痘病毒、牛痘病毒等痘病毒科病毒具有高度敏感性，感染效率达 90% 以上，48 小时病毒滴度可达 10⁶-10⁷ PFU/mL，感染后 24 小时出现典型细胞病变（胞质内嗜酸性包涵体、细胞融合）；对人乳头瘤病毒（HPV）16 型也具有支持能力，可维持病毒 episome 形式复制，为皮肤病毒潜伏感染研究提供模型。

创伤修复功能：在体外划痕模型中，细胞迁移速率达 45μm / 小时，48 小时划痕闭合率超 90%；受机械损伤刺激后，转化生长因子 -β1（TGF-β1）分泌量在 12 小时内提升 4 倍，促进 α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达，模拟体内肌成纤维细胞转化过程。

痘病毒传播机制解析：利用 MM-S4 细胞模拟皮肤微环境，研究猴痘病毒的细胞间传播路径。通过活细胞成像发现，病毒通过丝状伪足介导的 “病毒串" 在细胞间直接传递，该过程依赖肌动蛋白聚合，阻断后病毒传播效率下降 65%，为开发阻断传播的药物提供靶点。

病毒与宿主互作研究：通过转录组测序发现，猴痘病毒感染后 MM-S4 细胞的 Ⅰ 型干扰素通路被显著抑制（IFN-β 表达下降 80%），而 NLRP3 炎症小体激活增强（IL-1β 分泌增加 5 倍），揭示病毒逃逸宿主免疫与诱发皮肤炎症的分子机制，为免疫调节治疗提供依据。

修复信号通路探索：构建 MM-S4 细胞与表皮细胞共培养模型，发现成纤维细胞分泌的肝细胞生长因子（HGF）可促进表皮细胞增殖与迁移，中和 HGF 后表皮再生速率下降 40%，证实其在皮肤创伤修复中的关键作用。

生物材料兼容性评估：可用于测试新型皮肤再生材料的性能，如将脱细胞真皮基质与 MM-S4 细胞共培养，细胞在材料孔隙中的增殖率达 85%，胶原分泌量较单纯培养提升 30%，为生物材料优化提供数据支撑。

抗病du药物筛选：基于对猴痘病毒的高敏感性，建立 96 孔板高通量筛选模型，日均可检测 200 种化合物。筛选出的新型核苷类似物对病毒的 EC₅₀=1.5μM，选择性指数（SI）＞60，动物实验显示其可缩短猴痘皮损愈合时间 40%，为皮肤病毒感染治疗提供候选药物。

皮肤刺激性测试：替代动物实验用于化妆品与外用制剂的安全性评估，通过检测药物对细胞活力、乳酸脱氢酶释放及 IL-6 分泌的影响，建立三级刺激性评价标准，与兔皮肤刺激实验结果一致性达 88%，符合动物实验替代的 3R 原则。

培养基：DMEM/F12（1:1）培养基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸，pH 维持在 7.2-7.4，可加入 5ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）促进细胞增殖与表型维持。

传代流程：当细胞融合度达 70%-80% 时，弃旧培养基，PBS 洗涤 2 次，加入 0.25% yi酶 - EDTA 溶液，37℃孵育 3-4 分钟至细胞变圆，加入含血清的培养基终止消化，按 1:3 比例接种至新培养瓶，避免过度融合导致细胞形态纤维化。

冻存保护：取对数生长期细胞，用含 10% DMSO 的wan全培养基重悬至密度 1×10⁶个 /mL，程序降温后液氮保存，复苏时 37℃水浴快速解冻，直接接种至预热培养基，传代 1 次后即可用于实验（细胞活力＞85%）。

痘病毒接种：细胞以 4×10⁴个 / 孔接种 24 孔板，培养 24 小时至融合度 60%，用无血清培养基稀释病毒（MOI=0.05），37℃吸附 1.5 小时，换含 2% 血清的维持液，每日观察细胞病变，72 小时后通过蚀斑实验测定病毒滴度。

划痕实验：细胞铺满 6 孔板后，用 200μL 枪头垂直划痕，PBS 洗涤去除脱落细胞，加入含 1% 血清的培养基，分别在 0 小时、24 小时、48 小时拍照，ImageJ 软件计算划痕闭合率。

优势：

局限性：