RNBEC/HL-033大鼠正常膀胱上皮细胞系
RNBEC/HL-033大鼠正常膀胱上皮细胞系作为源自大鼠膀胱黏膜的上皮细胞模型，因保留膀胱上皮te有的屏障功能与分泌特性，在膀胱生理功能调控、尿路疾病机制及损伤修复研究中具有重要价值，成为探究膀胱上皮细胞生物学特性及相关疾病的关键实验工具。
细胞特性与来源背景：该细胞系源自大鼠膀胱黏膜的移行上皮组织，经原代培养和纯化获得。细胞形态呈典型上皮样，多为多边形或立方形，胞体大小均匀（直径约 18-22μm），胞质丰富且呈嗜酸性，可见大量桥粒结构和中间丝，约 15% 细胞呈现双核特征，细胞核呈圆形或椭圆形，位于细胞中央，核仁清晰。生长方式为贴壁生长，呈单层 “铺路石" 样排列，具有明显的接触抑制现象，传代后 24 小时贴壁率达 94%。核心参数符合正常膀胱上皮细胞特征：倍增时间约 65 小时，连续传代 20 次后仍保持稳定的生物学特性；表面标志物表达du特，细胞角蛋白 13（CK13）阳性率达 95%，膀胱上皮特异性标志物 uroplakin III 阳性率 93%，紧密连接蛋白 occludin 阳性率 91%；具有正常的二倍体核型（染色体数 42 条），无染色体畸变；屏障功能显著，跨上皮电阻（TEER）值达 450Ω・cm²，对尿素的通透性仅为 0.25μL/(h・cm²)；分泌功能活跃，黏蛋白（MUC5AC）基础分泌量达 32ng/mL，防御素 β2 分泌量达 18pg/mL；无微生物污染，细胞纯度达 97%，保障实验结果的可靠性。
科研应用价值：在膀胱屏障功能研究中，RNBEC/HL-033 细胞经脂多糖（LPS）处理 48 小时后，紧密连接蛋白 claudin-4 表达量下降 55%，跨上皮电阻值降低 60%，细菌黏附率增加 4.2 倍，可模拟膀胱炎状态下膀胱上皮屏障的破坏过程，为解析膀胱黏膜防御机制提供理想模型。
膀胱损伤修复研究方面，该细胞经硝suan银（膀胱损伤诱导剂）处理后，乳酸脱氢酶（LDH）释放量增加 4.8 倍，损伤区域面积占比达 38%，增殖相关基因 Ki67 表达量提升 50%；而经表皮生长因子（EGF）处理后，细胞迁移速率增加 60%，损伤修复率提升 45%，可模拟化学性膀胱损伤及修复过程，适用于探究膀胱上皮再生机制。
尿路疾病研究领域，该细胞经高浓度尿液溶质（尿酸盐结晶 500μmol/L）处理后，炎症因子 IL-8 分泌量增加 5.2 倍，活性氧（ROS）水平提升 65%，细胞凋亡率达 35%，能很好地模拟膀胱结石引起的上皮损伤，为探究尿路结石相关膀胱炎的发病机制提供实验基础。此外，该细胞与膀胱平滑肌细胞共培养时，平滑肌细胞的收缩相关蛋白 MLCK 表达量增加 3 倍，可用于探究上皮 - 平滑肌相互作用在膀胱功能调控中的机制。
培养与保存规范：推荐使用含 15% 胎牛血清的 Keratinocyte-SFM 培养基，添加 0.1ng/mL 表皮生长因子（EGF）、0.5μg/mL 氢化ke的松及 1% 抗生素混合液，培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 2 天更换一次，以维持细胞的屏障功能和分泌活性。传代时，用 PBS 冲洗细胞 2 次，加入专用上皮细胞解离液，37℃孵育 8-10 分钟，待细胞边缘收缩后轻轻吹打使细胞脱落，传代比例为 1:2-1:3，每 5-6 天传代一次，避免过度传代导致分化标志物表达下降。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，细胞浓度调整为 3×10⁶个 /ml，经程序降温（-20℃1 小时→-80℃过夜→液氮保存）后，复苏存活率达 85% 以上，3-4 代内可恢复正常的生长和屏障功能。运输采用干冰冷冻运输或培养瓶活细胞运输，收到细胞后需静置培养 24 小时，更换培养基后观察细胞形态，确认无异常漂浮物且排列紧密后进行实验。该细胞系仅限科研使用，操作时需避免频繁更换培养温度，以防影响紧密连接的稳定性。
RNBEC/HL-033 大鼠正常膀胱上皮细胞系以其稳定的膀胱上皮特性、完整的屏障功能及典型的损伤应答能力，在膀胱生物学研究与尿路疾病机制探索中发挥着重要作用，为揭示膀胱疾病的发病机制和开发膀胱保护药物提供了可靠的细胞模型。
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