RM-3猕猴肾细胞系，上皮样，贴壁生长，保留肾小管上皮特性，对腺病毒等敏感，支持复制，适用于病毒分离、肾损伤模型及相关药物筛选。

表型标志物表达：高表达集合管上皮细胞特异性标志物，如水通道蛋白 2（AQP2）、上皮钠通道（ENaC），免疫荧光阳性率＞95%；同时表达髓质特异性转运蛋白尿素转运蛋白 B（UT-B），其表达量为皮质来源细胞的 8 倍，与原代髓质集合管细胞水平一致。

病毒敏感性：对腺病毒（Ad5、Ad7 型）的感染效率达 95% 以上，48 小时病毒滴度可达 10⁷-10⁸ TCID₅₀/mL，感染后 20 小时出现典型细胞病变（细胞聚集成团、核内包涵体形成）；对 BK 病毒等多瘤病毒也具有特异性敏感性，可检测到病毒 DNA 复制，为肾移植后病毒感染研究提供模型。

髓质功能模拟：在高渗环境（300mOsm/kg H₂O）中可维持稳定的细胞形态，AQP2 表达上调 3 倍，对水的重吸收效率达原代集合管细胞的 65%（通过放射性水通透实验检测）；能响应抗利尿激素（ADH）刺激，1 小时内细胞内 cAMP 浓度升高 5 倍，模拟肾脏髓质的尿浓缩功能。

腺病毒分离与鉴定：可用于从临床样本中分离肾脏嗜性腺病毒，如肾移植患者尿液样本接种后，48 小时即可观察到典型核内包涵体，分离效率达 90%，较传统 HEK293 细胞缩短 16 小时，为腺病毒相关肾病的快速诊断提供技术支持。

腺病毒载体疫苗生产：因对腺病毒的高效支持能力，可用于重组腺病毒载体疫苗的生产工艺优化。在微载体培养系统中，重组腺病毒滴度达 10⁹ PFU/mL，外源基因表达量较 HEK293 细胞提升 2 倍，疫苗中残留宿主细胞蛋白＜50ng / 剂，符合人用疫苗生产标准。

尿浓缩功能机制解析：利用 RM-3 细胞研究 AQP2 的调控机制，发现低渗刺激可使 AQP2 从胞内囊泡转移至细胞膜（膜定位率提升 4 倍），该过程依赖微管蛋白聚合，阻断后水重吸收效率下降 70%，为尿崩症发病机制研究提供分子依据。

髓质损伤模型构建：通过缺血再灌注模拟建立髓质损伤模型，RM-3 细胞在缺氧 4 小时复氧 12 小时后，细胞活力下降 45%，AQP2 表达下调 60%，同时伴有炎症因子 IL-1β 分泌增加 8 倍，与人类急性肾损伤的髓质病理特征高度一致，为髓质保护药物筛选提供平台。

利尿药物筛选：基于其对水重吸收的调控功能，建立高通量利尿药物筛选模型。筛选出的新型 AQP2 抑制剂可使 RM-3 细胞水通透效率下降 65%，动物实验显示其利尿效果为呋sai米的 1.5 倍，且无电解质紊乱副作用，为开发新型利尿药提供候选分子。

靶向毒性评价：可用于评估药物对肾脏髓质的特异性毒性，通过检测细胞活力、AQP2 表达及尿素转运功能，建立髓质毒性分级标准。例如，某抗生素在 50μg/mL 浓度下即可导致 RM-3 细胞 UT-B 表达下调 50%，与临床报道的肾髓质损伤特征一致，预测准确率达 83%。

培养基：DMEM/Ham's F12（1:1）培养基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸、5mM 尿素（维持髓质细胞表型），pH 维持在 7.2-7.4，可加入 5ng/mL 血管内皮生长因子（VEGF）促进细胞增殖与功能维持。

传代流程：当细胞融合度达 60% 时，弃旧培养基，PBS 洗涤 2 次，加入细胞解离液，37℃孵育 6-8 分钟至细胞脱落，加入含血清的培养基终止解离，按 1:2 比例接种至预涂胶原蛋白的培养瓶（增强贴壁能力），避免机械吹打损伤细胞极性。

冻存保护：取对数生长期细胞，用含 10% DMSO 的wan全培养基重悬至密度 8×10⁵个 /mL，程序降温后液氮保存，复苏时 37℃水浴快速解冻，接种至预涂培养瓶，传代 3 次待细胞状态稳定后使用。

腺病毒接种：细胞以 2×10⁴个 / 孔接种 24 孔板，培养 48 小时至融合度 50%，用无血清培养基稀释腺病毒（MOI=0.5），37℃吸附 2 小时，换含 2% 血清的维持液，72 小时后通过噬斑实验测定病毒滴度，或通过免疫荧光检测病毒 hexon 蛋白。

水通透功能检测：在 Transwell 小室中培养细胞至形成单层，上室加入含荧光标记水的溶液，30 分钟后检测下室荧光强度，计算水通透系数，以此评估细胞的尿浓缩功能状态。

优势：

局限性：