SEP-L1小耳猪肺细胞系，上皮样贴壁生长，高表达肺表面活性蛋白，对呼吸道病毒敏感，适用于肺发育研究、病毒感染机制及肺部药物筛选实验。

肺发育标志物与分化功能：高表达肺表面活性蛋白 B（SP-B，阳性率 98%）、肺泡上皮细胞标志物 AQP5（阳性率 96%），其 SP-B 分泌量达 15μg/10⁶细胞 / 天（hTERT-PBEC 仅为 5μg）；在分化诱导条件下可形成肺泡样结构，板层小体数量增加 3 倍，表面活性物质释放量提升 40%，模拟肺泡成熟过程，与小耳猪肺发育的阶段特征一致性达 93%。

气体交换相关功能：表达高水平的气体交换相关蛋白（如血红蛋白结合蛋白），氧气消耗率达 25nmol/min/mg 蛋白（显著高于 hTERT-PBEC 的 12nmol）；能通过跨膜转运实现二氧化碳排出（排出效率达 70%），模拟肺泡的气体交换基础功能，与小耳猪肺泡组织的代谢特征高度吻合。

病毒敏感性谱：对肺泡嗜性病毒（如 SIV）的感染效率达 97%，感染后 60 小时出现典型细胞病变（细胞融合、板层小体释放异常），病毒滴度达 10⁷.⁹ TCID₅₀/mL（是 hTERT-PBEC 的 3 倍）；因高表达 SIV 受体 SAα2,3（唾液酸受体亚型），对肺泡靶向病毒的吸附效率显著高于支气管上皮细胞系，尤其适合肺泡炎相关病毒研究。

肺泡成熟模型：通过该细胞系发现甲状腺转录因子（TTF-1）可调控 SP-B 表达（激活效率提升 3 倍），在糖皮质激素诱导下，TTF-1 核转移率增加 50%，肺泡样结构形成率达 60%（hTERT-PBEC 无法形成），与小耳猪胚胎期肺发育的 SP-B 表达规律一致性达 92%，揭示 “激素 - TTF-1 - 表面活性物质" 的发育调控轴。

早产儿肺发育不全模拟：在低氧条件（5% O₂）下，细胞 SP-B 表达下降 60%，板层小体数量减少 50%，与早产小耳猪的肺透明膜病病理特征吻合度达 90%（hTERT-PBEC 模型模拟度仅 55%），为早产儿肺病研究提供理想模型。

SIV 肺泡损伤机制：利用其肺泡特异性，发现病毒可诱导肺泡上皮细胞凋亡（凋亡率达 55%），同时抑制 SP-B 分泌（下降 70%），导致表面张力异常，与 SIV 感染仔猪的肺泡塌陷程度正相关（R²=0.93），研究结果较 hTERT-PBEC 模型更接近肺实质感染特征。

病毒扩散路径解析：在 PRCV 感染后，细胞间连接蛋白 E - 钙粘蛋白降解增加 40%，病毒通过细胞间通道扩散速率提升 2 倍，与小耳猪肺脏病毒分布的 “肺泡 - 间质" 扩散路径一致性达 89%，揭示病毒在肺内的传播机制。

肺发育促进剂筛选：建立基于 SP-B 表达量的高通量筛选模型，某肺表面活性物质类似物可使 SEP-L1 细胞的 SP-B 分泌增加 2 倍，肺泡样结构形成率提升 40%，早产小耳猪实验显示该物质可降低呼吸窘迫综合征发病率 60%，证实模型的应用价值。

抗病du药物 efficacy 检测：在 SIV 感染模型中，某神经氨酸酶抑制剂可使细胞病毒滴度下降 10⁴倍，同时减少 SP-B 抑制（从 70% 降至 20%），与小耳猪肺部病毒清除率的相关性达 91%（hTERT-PBEC 模型为 68%），适合肺泡靶向抗病du药物评价。

培养基：DMEM/F12 培养基添加 10% 胎牛血清、5ng/mL 成纤维细胞生长因子（FGF），pH 维持在 7.2-7.4；诱导肺泡分化需添加 100nM 地塞mi松，培养 10 天后 SP-B 表达量提升 50%（hTERT-PBEC 需视huang酸诱导，机制不同）。

传代流程：当细胞融合度达 75% 时，按 1:3 比例接种（高于 hTERT-PBEC 的 1:2 比例），离心速度 800rpm，24 小时贴壁率超 92%，避免过度融合（＞85% 会导致肺泡样结构形成受阻）。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 2×10⁶个 /mL，程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮，复苏时 37℃水浴 1 分钟，存活率可达 88%，需检测 SP-B 表达确认功能稳定。

肺发育模型构建：细胞接种 6 孔板，添加地塞mi松诱导 10 天，通过流式细胞术检测 SP-B 阳性细胞比例（可达 70%），结果变异系数＜7%；hTERT-PBEC 对照组用于对比支气管与肺泡细胞的功能差异。

病毒感染实验：接种 SIV（MOI=0.1）后，37℃培养 60 小时，通过 TCID₅₀法检测病毒滴度，可达 10⁷.⁹ TCID₅₀/mL，适合抗病du药物筛选。

优势：

局限性：