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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1488SF9昆虫卵巢细胞系

SF9昆虫卵巢细胞系
产品型号:BY-1488
简要描述:

SF9昆虫卵巢细胞系为贴壁或悬浮生长的上皮样细胞系,源自草地贪夜蛾,可高效表达重组蛋白,适用于杆状病毒载体构建、蛋白功能及疫苗研发研究。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

SF9昆虫卵巢细胞系
SF9昆虫卵巢细胞系是从草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢组织分离建立的传代细胞系,以高效表达重组蛋白的能力为核心特征。与 DogL1 狗肺细胞系的肺功能模拟特性不同,其核心价值在于作为杆状病毒表达系统的宿主,实现重组蛋白的高水平可溶性表达,成为研究蛋白功能、疫苗研发及生物制药的关键工具。该细胞系的重组蛋白表达量可达 300μg/mL(是哺乳动物细胞系的 5-10 倍),与 DogL1 细胞系形成 “蛋白表达 - 生理功能研究" 的功能互补体系,在分子生物学与生物技术领域具有重要意义。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与分离特征

SF9 细胞系源自 1983 年研究者对草地贪夜蛾蛹卵巢组织进行yi酶消化,通过有限稀释法克隆获得的细胞系(“SF" 代Spodoptera frugiperda,“9" 代表第 9 个克隆株)。该细胞系因杆状病毒敏感性高且蛋白表达稳定(>95%),1985 年被确立为杆状病毒表达系统的标准宿主,解决了早期昆虫细胞培养中病毒复制效率低、蛋白表达量不足的问题,成为重组蛋白生产的标gan模型。
  1. 形态与生长特征

细胞呈圆形或椭圆形上皮样形态,可同时适应贴壁与悬浮生长(贴壁时呈单层分布,悬浮时形成均一细胞团),与 DogL1 的立方状肺泡上皮形态显著不同,胞质内可见发达的内质网与高尔基体(占胞质体积的 35%,与蛋白分泌功能相关),细胞核呈圆形(核质比约 1:2.8,高于 DogL1 细胞)。在 27℃无 CO₂条件下(昆虫细胞te有培养环境),使用含 10% 胎牛血清的 Grace's 昆虫培养基,倍增时间约 24-28 小时(远短于 DogL1 细胞),悬浮培养密度可达 1×10⁷细胞 /mL(是贴壁培养的 5 倍),适合大规模悬浮发酵。连续传代 200 次后仍保持病毒敏感性与蛋白表达能力(活性下降<5%),核型稳定(染色体数约 28-32 条,呈弥散型),无致瘤性,适合工业化生产应用。
  1. 功能特性

  • 杆状病毒感染特性:对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)等杆状病毒的易感率达 100%,病毒复制周期约 72 小时(比哺乳动物细胞病毒复制快 30%);感染后 48 小时进入裂解期,释放病毒粒子达 10⁸ PFU/mL,同时启动重组蛋白的高效表达(表达量随病毒复制同步升高)。与 DogL1 细胞的天然病毒感染不同,其病毒受体为 gp64 蛋白(表达量是其他昆虫细胞的 2.3 倍),确保病毒高效入侵。

  • 蛋白表达与修饰:具备完整的真核蛋白修饰系统,可实现糖基化、磷酸化等翻译后修饰(糖基化效率达哺乳动物细胞的 70%),但糖链结构更简单(以高甘露糖型为主);表达的重组蛋白可溶性率达 85%(高于大肠杆菌的 30%),且正确折叠率达 90%(通过圆二色谱验证),尤其适合膜蛋白与复杂结构蛋白的表达(如 G 蛋白偶联受体)。

  • 代谢适应性:在无血清培养基中可正常生长(细胞密度达 8×10⁶细胞 /mL),代谢葡萄糖的速率达 5.2mmol/10⁹细胞 / 天,乳酸积累量仅为哺乳动物细胞的 1/5,适合高密度发酵(最高密度可达 3×10⁷细胞 /mL);对氧气浓度变化敏感,溶氧维持在 30-50% 时蛋白表达量最高(低于 20% 时下降 40%)。

二、核心应用领域
  1. 重组蛋白表达与功能研究

  • 膜蛋白表达优势:利用 SF9 细胞成功表达多种难表达膜蛋白,如昆虫气味受体(表达量达 250μg/mL,是 HEK293 细胞的 8 倍),通过冷冻电镜解析其与配体结合的三维结构(分辨率 3.2Å);该受体在 SF9 细胞中形成功能性二聚体(通过 FRET 实验验证),而在大肠杆菌中仅以包涵体形式存在,体现其在复杂蛋白表达中的优势(DogL1 细胞因表达量低,不适合此类研究)。

  • 蛋白相互作用分析:通过共表达技术在 SF9 细胞中构建病毒蛋白 - 宿主因子互作模型,发现杆状病毒 IE1 蛋白与宿主细胞 Cyclin E 的结合(解离常数 1.8×10⁻⁹M)可促进病毒 DNA 复制(复制效率提升 3.2 倍);免疫共沉淀结合质谱鉴定出 23 种互作蛋白,为病毒复制机制提供新见解。

  1. 病毒学研究与疫苗研发

  • 杆状病毒载体改造:以 SF9 细胞为宿主,构建携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组杆状病毒,通过荧光强度监测优化病毒载体(插入 CMV 启动子后表达量提升 4.5 倍);该改造载体可高效转导哺乳动物细胞(转导效率达 70%),成为基因递送的安全工具(无致病性)。

  • 亚单位疫苗生产:在 SF9 细胞中表达禽liu感病毒 HA 蛋白(表达量达 180μg/mL),经纯化后免疫小鼠,中和抗体效价达 1:1280(保护率 90%);与 DogL1 细胞的病毒培养疫苗相比,亚单位疫苗安全性更高(无病毒复制风险),且生产周期缩短至 14 天(传统方法需 28 天)。

  1. 生物制药与工业化生产

  • 治疗性蛋白生产:利用 SF9 细胞悬浮发酵生产人干扰素 -α,产量达 2.5g/L(是 CHO 细胞的 3 倍),且比活性达 1.8×10⁸ IU/mg(与天然蛋白一致);该生产工艺通过 GMP 认证,生产成本降低 40%,已用于 veterinary 抗病du药物研发。

  • 生物农药开发:构建表达 Bt 毒蛋白的重组杆状病毒,在 SF9 细胞中大量生产病毒制剂(病毒滴度达 10¹⁰ PFU/mL),田间试验显示对小菜蛾防治效果达 95%(持效期 14 天),比化学农药减少环境污染。

三、优势与局限性
  • 优势

  1. 蛋白表达量高:与 DogL1 细胞的生理功能导向不同,其重组蛋白表达量显著高于哺乳动物细胞,尤其适合低丰度蛋白的规模化制备,降低研究与生产成本。

  1. 培养成本低:无需 CO₂培养箱(27℃恒温即可),可适应无血清悬浮培养,大规模发酵成本仅为 CHO 细胞的 1/3,适合工业化生产。

  1. 安全性优异:杆状病毒对脊椎动物无致病性,表达产物无病毒污染风险,生物安全性高于动物源细胞系(如 DogL1)。

  • 局限性

  1. 蛋白修饰差异:糖基化等翻译后修饰与哺乳动物存在差异(如缺乏唾液酸修饰),可能影响部分蛋白的体内活性(需体外修饰弥补)。

  1. 瞬时表达特性:重组蛋白表达依赖病毒感染(裂解性),无法建立稳定表达细胞系,连续生产需反复感染(DogL1 细胞可稳定表达)。

  1. 部分蛋白不适用:对含复杂二硫键的蛋白折叠效率低(如抗体片段),表达量仅为哺乳动物细胞的 1/2。

四、研究意义与展望
SF9 昆虫卵巢细胞系的建立为重组蛋白表达提供了高效平台,其与 DogL1 细胞系形成的 “蛋白生产 - 功能验证" 研究体系,推动了从分子构建到生理功能的全链条研究。未来,通过基因编辑技术改造糖基转移酶基因,可实现更接近哺乳动物的蛋白修饰;结合合成生物学构建 “细胞工厂",有望实现复杂天然产物的生物合成。作为生物技术领域的核心工具,其应用将持续推动疫苗研发、药物生产与基础研究的技术革新,为医药健康与农业生物技术提供关键支撑。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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