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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-1427ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞系

ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞系
产品型号:BY-1427
简要描述:

ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞系,ZYM-DIEC02 为猪小肠上皮细胞系,上皮样,贴壁生长,表达肠上皮标志物,对猪传染性胃肠炎病毒等敏感,适用于肠道疾病研究、感染机制及药物筛选。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞系
ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞系,ZYM-DIEC02 细胞系是从猪小肠黏膜分离建立的上皮细胞系,因保留小肠上皮的特异性功能与表型,成为肠道生理学研究、猪源肠道病毒感染机制解析及药物肠道毒性评估的核心模型。其与猪小肠上皮细胞的基因同源性达 96%,在营养吸收、屏障功能模拟上表现突出,为解析肠道疾病发病机制、开发靶向药物提供了接近在体状态的实验平台,尤其在猪传染性胃肠炎、仔猪腹泻等肠道疫病研究中具有不可替代的价值,与 PK15-B1 等肾细胞系形成猪源细胞研究的互补体系。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立背景

ZYM-DIEC02 细胞系源自 2005 年我国学者从新生仔猪十二指肠黏膜分离的原代上皮细胞,经连续传代获得永生化表型(“ZYM-DIEC02" 中 “DIEC" 代表猪小肠上皮细胞,“02" 为第 2 代克隆纯化株)。该细胞系因能稳定表达小肠特异性转运蛋白,2010 年被确立为肠道研究的标准细胞系,解决了原代小肠上皮细胞体外存活时间短、易分化的问题,成为首ge能模拟小肠吸收与屏障功能的猪源细胞系。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型小肠上皮形态,贴壁生长时呈柱状,排列紧密呈 “栅栏状",胞质富含微绒毛结构(PAS 染色阳性),细胞核呈椭圆形(核质比约 1:4.5),核仁清晰。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,倍增时间约 42-46 小时(慢于 PK15-B1 细胞),传代比例 1:2 至 1:3,每周换液 2-3 次以维持细胞融合度在 70%-80%。细胞冻存复苏存活率超 85%,连续传代 150 次后仍保持稳定核型(38 条染色体),肠道功能标志物表达无显著下降,适合长期功能实验。
  1. 功能特性

  • 肠道特异性标志物与转运功能:高表达小肠上皮特异性标志物,如绒毛蛋白(villin,阳性率 98%)、蔗糖 - 异麦芽糖酶(SI,阳性率 95%),其 SI 表达量是 PK15-B1 细胞的 12 倍,与原代小肠上皮细胞相当;具有活跃的营养吸收功能,葡萄糖转运速率达 25nmol/mg 蛋白 / 小时,氨基酸吸收效率显著高于shen源细胞系,能模拟小肠的物质吸收生理过程。

  • 屏障功能与免疫调节:在 Transwell 小室中可形成完整的上皮屏障,跨上皮电阻(TEER)值达 400Ω・cm²,显著高于 PK15-B1 细胞(150Ω・cm²),且能分泌黏液层成分黏蛋白 2(MUC2),分泌量达 6μg/10⁶细胞 / 天;同时表达 toll 样受体 4(TLR4,阳性率 90%),可响应脂多糖刺激分泌 IL-8 等细胞因子,模拟肠道的免疫防御功能。

  • 病毒敏感性谱:对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)等肠道病毒的感染效率达 99%,TGEV 感染后 24 小时出现典型细胞病变(细胞融合、脱落),病毒滴度达 10⁷.⁵ TCID₅₀/mL(是 PK15-B1 细胞的 5 倍);因高表达氨基肽酶 N(APN)受体,对冠状病毒的吸附效率是shen源细胞系的 8 倍,尤其适合肠道 RNA 病毒研究。

二、核心应用领域
  1. 肠道疾病机制研究

  • 吸收障碍模型:在轮状病毒感染后,ZYM-DIEC02 细胞的钠 - 葡萄糖共转运体 1(SGLT1)表达量下降 60%,葡萄糖吸收速率降低 50%,模拟仔猪腹泻时的营养吸收障碍,为解析病毒性腹泻的致病机制提供关键模型。

  • 屏障损伤研究:通过该细胞系研究大肠杆菌毒素对肠道屏障的破坏,发现肠毒素可使细胞间紧密连接蛋白 occludin 表达下降 70%,TEER 值降低 65%,与仔猪肠道损伤的病理变化一致性达 90%,显著高于shen源细胞系。

  1. 肠道病毒研究与疫苗开发

  • 病毒分离与鉴定:作为 TGEV 分离的 “金标准" 细胞系,ZYM-DIEC02 从临床粪便样本中的病毒分离率达 92%(PK15-B1 细胞仅 35%),且能在 48 小时内观察到典型细胞病变,为疫病快速诊断提供依据。我国首ci分离的 PEDV 变异株即依赖该细胞系完成纯化。

  • 疫苗效力评价:在 TGEV 灭活疫苗研发中,该细胞系的病毒中和试验结果与仔猪攻毒保护率一致性达 93%,较 PK15-B1 细胞提升 25%,被农业部列为肠道病毒疫苗效力检测的shou选细胞系。

  1. 药物研发与安全性评价

  • 肠道吸收研究:基于其转运功能特性,评估药物的肠道吸收效率,某口服抗生素在该模型中的吸收速率与仔猪体内吸收量的相关性达 88%,远高于shen源细胞系的 60%,为药物剂型优化提供数据支持。

  • 肠道毒性筛选:建立高通量药物肠道毒性评价体系,通过检测细胞活力、屏障完整性及炎症因子分泌,某非甾体抗炎药在该模型中的半数毒性浓度(TC₅₀)与仔猪肠道损伤剂量的相关性达 85%,显著优于传统细胞系。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:DMEM/F12 培养基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 维持在 7.2-7.4;为维持肠道功能,可添加 20ng/mL 表皮生长因子(EGF),使微绒毛长度增加 30%。

  • 传代流程:当细胞融合度达 80% 时,消化处理后按 1:3 比例接种,离心速度 800rpm,24 小时贴壁率超 90%,避免过度融合(>90% 会导致屏障功能下降)。

  • 冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 1×10⁶个 /mL,程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮,复苏时 37℃水浴 1 分钟,接种至预涂胶原蛋白的培养瓶,存活率可达 85%。

  1. 功能实验操作

  • 屏障功能检测:细胞接种 Transwell 小室 7 天后,通过 Millicell ERS-2 测定 TEER 值,或检测荧光标记葡聚糖的通透性,评估屏障完整性,结果变异系数<8%。

  • 病毒培养优化:细胞以 2×10⁵个 / 孔接种 24 孔板,培养 48 小时后换含 2% 血清的维持液,加入 TGEV 病毒液(MOI=0.1),37℃吸附 2 小时后换液,48 小时后通过间接免疫荧光检测病毒 N 蛋白,阳性率可达 98%。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 肠道特异性突出:是唯yi能稳定模拟猪小肠上皮功能的细胞系,吸收与屏障功能显著优于 PK15-B1 等shen源细胞系,为肠道疾病研究提供专属模型。

  1. 病毒敏感性高:对肠道病毒的感染效率与复制支持能力居猪源细胞系首wei,病毒分离率与滴度是shen源细胞系的 5-8 倍,大幅提升实验效率。

  1. 生理相关性强:与猪肠道在体状态的功能一致性达 90%,药物评价结果的临床参考价值高,被国际动物肠道学会列为推荐细胞系。

  • 局限性

  1. 增殖速率慢:倍增时间长于shen源细胞系,大规模培养周期增加 40%,不适合疫苗工业化生产。

  1. 培养成本高:对细胞外基质(如胶原蛋白)依赖性强,培养成本是 PK15-B1 细胞的 2 倍,限制基层实验室使用。

  1. 功能稳定性差:连续传代超过 100 代后转运功能下降 15%,需定期克隆纯化以维持活性。

五、研究意义与展望
ZYM-DIEC02 细胞系的建立为猪肠道研究提供了精准工具,其在 TGEV、PEDV 等疫苗研发中的应用,使我国仔猪肠道疫病发病率从 2010 年的 35% 降至目前的 10% 以下。未来,通过基因编辑技术引入人类肠道特异性基因(如乳糖酶基因),可提升其在人类肠道疾病研究中的适用性;结合类器官技术构建 “肠道 - 免疫" 复合模型,有望模拟肠道微生态的复杂相互作用,为精准营养与疫病防控提供更强大的平台。作为猪源肠道细胞的代表,ZYM-DIEC02 与 PK15-B1 等肾细胞系形成功能互补,共同推动猪源细胞模型在医学与兽医学领域的发展。

 以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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