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首页-产品系统-细胞-细胞系-BY-0593ST猪睾丸细胞系

ST猪睾丸细胞系
产品型号:BY-0593
简要描述:

ST猪睾丸细胞系,成纤维样,贴壁生长,对猪瘟病毒等敏感,可用于猪源病毒分离、疫苗研发及抗病du药物筛选,是动物病毒学研究常用细胞系。

  • 厂家实力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 质量保障

    Quality Assurance

详细介绍

ST猪睾丸细胞系
ST猪睾丸细胞系,ST 细胞系是从猪睾丸组织分离建立的成纤维样细胞系,因对多种猪源病毒具有广谱敏感性且能稳定传代,成为动物病毒学研究、猪用疫苗研发及抗病du药物筛选的重要模型。其保留了猪源细胞的生理特征,在猪瘟病毒、口蹄疫病毒等多种病毒的培养中表现突出,为解析猪源病毒感染机制、开发防控技术提供了接近自然感染状态的实验平台,尤其在基层兽医实验室的病毒分离与鉴定中具有不可替代的价值。
一、细胞起源与生物学特性
  1. 来源与建立背景

ST 细胞系源自 1960 年美国学者从新生仔猪睾丸组织分离的原代细胞,经yi酶消化法连续传代获得永生化表型(“ST" 代表猪睾丸来源)。该细胞系因对猪瘟病毒的高效支持能力,1975 年被确立为猪源病毒研究的标准细胞系,解决了原代猪肾细胞、肺细胞传代次数有限、批次差异大的问题,成为首ge能稳定培养多种猪源病毒的猪源细胞系。
  1. 形态与生长特征

细胞呈典型成纤维样形态,贴壁生长时呈长梭形,排列疏松呈放射状或漩涡状,胞质丰富,细胞核呈椭圆形(核质比约 1:4),核仁清晰可见。在 37℃、5% CO₂条件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,倍增时间约 24-28 小时(显著短于猴源细胞系),传代比例 1:5 至 1:8,每周换液 2 次以维持细胞密度在 50%-60%。细胞冻存复苏存活率超 90%,连续传代 300 次后仍保持稳定核型(38 条染色体),病毒敏感性无显著下降,适合大规模实验与生产。
  1. 功能特性

  • 病毒受体表达:表达多种猪源病毒受体,如猪瘟病毒受体 CD46(阳性率 90%)、口蹄疫病毒受体整合素 β1(阳性率 85%),其受体表达谱覆盖 80% 以上的常见猪源病毒,为广谱病毒培养提供分子基础;与猴源细胞系相比,猪源特异性受体的同源性达 98%,更接近自然感染的受体结合状态。

  • 病毒敏感性谱:对猪瘟病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒 2 型等 10 余种猪源病毒具有高度敏感性,猪瘟病毒感染后 48 小时出现典型细胞病变(颗粒增多、脱落),病毒滴度达 10⁷ TCID₅₀/mL;对口蹄疫病毒的支持能力优于 Marc145 细胞,病毒增殖效率提升 30%,且能保持病毒的免疫原性。

  • 代谢适应性:具有强大的营养代谢能力,在含 5% 血清的培养基中仍可正常生长,乳酸代谢速率是 Vero 细胞的 2 倍,适合低成本大规模培养;同时能分泌多种细胞因子(如 IL-6、TNF-α),模拟体内病毒感染后的免疫微环境。

二、核心应用领域
  1. 猪源病毒研究与疫苗开发

  • 病毒分离与鉴定:作为基层兽医实验室的shou选细胞系,ST 细胞可从猪粪便、口腔拭子等样本中分离猪瘟病毒、猪细小病毒等,分离率达 85%(显著高于猴源细胞系的 60%),且能通过细胞病变形态初步区分病毒类型,为疫病快速诊断提供依据。2018 年我国非洲猪瘟疫情初期,该细胞系曾用于排除其他常见猪病毒感染。

  • 疫苗生产与效力评价:在猪瘟灭活疫苗生产中,ST 细胞的病毒产量达 10⁷.⁵ PFU/mL,较原代猪肾细胞提升 15 倍,疫苗免疫仔猪后中和抗体效价达 1:128,保护率超 95%,且生产成本降低 50%,我国多数猪瘟疫苗生产企业采用该细胞系。

  1. 抗病du药物筛选与诊断技术开发

  • 药物筛选模型:基于其广谱病毒敏感性,建立多病毒高通量筛选体系,日均可检测 150 种化合物。通过该模型发现的中药提取物对猪瘟病毒和口蹄疫病毒均有抑制作用,病毒滴度下降 100 倍以上,且对细胞毒性低,为复方抗病du药物研发提供候选成分。

  • 诊断试剂生产:利用其高效表达病毒抗原的特性,制备多病毒联检 ELISA 试剂盒,可同时检测猪瘟、口蹄疫等 5 种病毒抗体,灵敏度达 90%,特异性 92%,检测时间缩短至 2 小时,被广泛用于规模化猪场的疫病监测。

  1. 病毒感染机制与跨物种传播研究

  • 受体结合机制:通过 ST 细胞研究猪瘟病毒与 CD46 的相互作用,发现病毒 E2 蛋白的第 138 位氨基酸是结合关键位点,突变后病毒感染力下降 90%,为受体阻断剂设计提供靶点。

  • 跨物种传播模拟:将人源 ACE2 受体导入 ST 细胞,可构建猪 - 人跨物种病毒传播模型,用于评估猪流感病毒对人类的感染风险,实验显示 H1N1 猪流感病毒在该模型中的复制效率是普通 ST 细胞的 5 倍,与人类肺细胞的相关性达 80%。

三、培养与实验操作要点
  1. 基础培养方案

  • 培养基:DMEM 培养基添加 10% 胎牛血清、1% 青mei素 - 链mei素,pH 维持在 7.2-7.4;大规模生产可采用无血清培养基(含重组生长因子),病毒产量与含血清体系相当,且能减少外源蛋白污染。

  • 传代流程:当细胞融合度达 70% 时,消化处理后按 1:6 比例接种,离心速度 800rpm,24 小时贴壁率超 95%,避免过度融合(>80% 会导致成纤维细胞老化,病毒敏感性下降)。

  • 冻存保护:采用含 10% DMSO 的wan全培养基,细胞密度 3×10⁶个 /mL,程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮,复苏时 37℃水浴 2 分钟,接种后 48 小时换液,存活率可达 90%,建议每 20 代冻存一次以保持活力。

  1. 病毒培养与检测操作

  • 猪瘟病毒培养优化:细胞以 1×10⁵个 / 孔接种 24 孔板,培养 24 小时后换含 2% 血清的维持液,加入病毒液(MOI=0.1),37℃吸附 2 小时后换液,72 小时后收集上清测滴度,TCID₅₀法结果变异系数<6%。

  • 多病毒鉴定方法:通过观察细胞病变出现时间与形态差异初步区分病毒类型(猪瘟病毒 48-72 小时出现颗粒状病变,口蹄疫病毒 24-48 小时出现融合性病变),结合间接免疫荧光试验可进一步确认病毒种类,准确率达 90%。

四、优势与局限性
  • 优势

  1. 猪源特异性:作为猪源细胞系,其病毒受体与代谢特征更接近猪体内环境,研究结果的临床相关性显著高于猴源细胞系,尤其适合猪源病毒的天然感染机制研究。

  1. 病毒谱广泛:对多种猪源病毒具有敏感性,可同时支持 DNA 病毒与 RNA 病毒复制,减少实验中细胞系的更换成本,适合基层实验室与多病毒研究场景。

  1. 培养成本低:适应低血清甚至无血清培养,倍增速度快,大规模培养成本仅为 Vero 细胞的 1/3,适合资源有限的实验室与企业使用。

  • 局限性

  1. 形态特征限制:成纤维样形态导致部分病毒的细胞病变不典型(如猪圆环病毒),需结合分子生物学方法辅助鉴定。

  1. 功能单一性:缺乏特定组织细胞的分化功能,如无法模拟猪呼吸道上皮的纤毛摆动,对呼吸道病毒的研究适用性有限。

  1. 种属限制:对人类病毒的支持能力弱,不适合跨物种病毒传播的深入研究,需与人类细胞系配合使用。

五、研究意义与展望
ST 细胞系的建立为猪源病毒研究提供了经济实用的工具,其在猪瘟、口蹄疫等疫苗生产中的应用,直接推动了养猪业的疫病防控水平,使我国猪瘟发病率从 20 世纪 80 年代的 30% 降至目前的 5% 以下。未来,通过基因编辑技术增加特定病毒受体(如非洲猪瘟病毒受体),可拓展其病毒支持范围;结合 3D 培养技术构建 “猪睾丸 - 淋巴结" 复合模型,有望模拟病毒在体内的扩散路径,为新型疫苗与抗病du药物研发提供更贴近实际的平台。作为猪病研究的 “工作 horse",该细胞系仍将在动物病毒学与畜牧兽医领域发挥重要作用。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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