NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞系
NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞系源自 1962 年美国国立卫生研究院（NIH）从瑞士小鼠胚胎中分离建立的成纤维细胞系，因严格的传代规范（每 3 天传代一次，每次接种 3×10⁵细胞）而得名，是细胞生物学领域应用zui广泛的经典模型之一。
该细胞系保留了成纤维细胞的典型生物学特征。细胞呈长梭形或纺锤形，胞质丰富，细胞核呈椭圆形，在光学显微镜下可见清晰的细胞轮廓。作为贴壁生长细胞，其能分泌胶原蛋白、纤连蛋白等细胞外基质成分，形成致密的细胞单层，当细胞密度达到 80%-90% 汇合时，会因接触抑制现象停止增殖，这一特性与正常体细胞的生长调控机制高度一致，使其成为研究细胞增殖与接触抑制的理想模型。此外，NIH/3T3 细胞表达成纤维细胞特异性标志物波形蛋白（Vimentin），不表达上皮细胞标志物细胞角蛋白（Cytokeratin），可通过免疫荧光染色明确其细胞类型。
在体外培养体系中，NIH/3T3 细胞展现出优异的稳定性和可操作性。在含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基中，37℃、5% CO₂条件下生长良好，传代周期约 48-72 小时，冻存复苏后的存活率可达 90% 以上。与原代胚胎成纤维细胞相比，其克服了原代细胞传代次数有限（通常不超过 15 代）、功能易退化的缺陷，连续传代 50 次后仍能保持稳定的生长特性和接触抑制能力，且细胞群体均一性高，能有效减少实验误差，适合开展标准化研究。
NIH/3T3 细胞的显著优势在于其对转化事件的高度敏感性。当受到致癌病毒（如 SV40 病毒）、致癌基因（如 Ras、Src）或化学致癌物处理时，会失去接触抑制特性，形成多层生长的细胞集落，即发生恶性转化。这种转化表型可通过软琼脂克隆形成实验验证 —— 正常细胞无法在软琼脂中生长，而转化后的细胞能形成悬浮克隆，这一特征使其成为研究细胞癌变机制的黄金模型。
在应用领域，NIH/3T3 细胞的价值贯穿多个研究方向。在肿瘤学研究中，通过将候选致癌基因导入细胞，观察其是否诱导转化表型，可验证基因的致癌潜能；在信号通路研究中，利用其对生长因子（如 PDGF、EGF）的应答特性，解析细胞增殖信号的传导网络，例如检测 ERK1/2 磷酸化水平变化；在病毒学研究中，作为多种逆转录病毒的易感细胞，可用于病毒培养、滴度测定及病毒复制机制研究；在基因编辑领域，因其转染效率高，常作为 CRISPR/Cas9 技术的验证模型，评估基因敲除或敲入的效果。
此外，该细胞系在细胞生物学基础研究中也不ke或缺。其接触抑制特性被用于探究细胞周期调控机制，通过检测不同生长阶段的周期蛋白（如 Cyclin D1）表达，阐明细胞增殖的分子开关；在细胞迁移研究中，划痕实验显示 NIH/3T3 细胞具有活跃的运动能力，可通过分析迁移距离评估细胞的迁移潜能及相关调控因子的作用。
随着细胞共培养技术的发展，NIH/3T3 细胞常作为饲养层细胞支持干细胞的生长与分化，例如在胚胎干细胞培养中，其分泌的细胞因子能维持干细胞的未分化状态，为干细胞研究提供重要支撑。
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