LA795小鼠肺腺癌瘤株细胞系
LA795小鼠肺腺癌瘤株细胞系源自 615 近交系小鼠的自发性肺腺癌组织，是保留肺泡上皮细胞恶性转化特征和淋巴转移倾向性的经典肺部肿瘤模型，在肺腺癌的淋巴转移机制、气道侵袭特性及靶向药物筛选研究中具有重要价值，为解析肺腺癌的早期扩散和淋巴结定植规律提供了理想工具。
该细胞系呈现典型的肺腺癌细胞形态与表型特征。显微镜下，细胞呈立方状或柱状，以贴壁生长为主，排列呈腺泡样或乳头状结构，模拟肺泡 Ⅱ 型上皮的分化特征。细胞核呈圆形或椭圆形，核质比高，染色质呈细颗粒状，可见 1-2 个清晰核仁，核分裂象每 10 个高倍视野 5-7 个，胞质丰富，呈嗜酸性，部分细胞胞质内可见嗜酸性颗粒（类似肺泡表面活性物质颗粒）。电镜下可见细胞间存在紧密连接和桥粒，胞质内有层状小体，符合肺腺癌的超微结构特点。免疫表型分析显示，细胞高表达肺腺癌特异性标志物甲状腺转录因子 - 1（TTF-1）和表面活性蛋白 C（SPC），流式细胞术检测阳性率分别达 92% 和 88%，同时表达上皮细胞标志物 CK7（阳性率 85%），而鳞癌标志物 p63 表达阴性，证实其肺腺癌的组织来源特性。
体外培养体系中，LA795 细胞展现出稳定的增殖能力与强侵袭潜能。最适培养条件为含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基，添加 1% 非必需氨基酸，在 37℃、5% CO₂环境下，传代周期约 72 小时，对数生长期细胞活力达 90% 以上，倍增时间约 48 小时。其显著特点是对淋巴管内皮细胞的黏附与穿透能力突出，Transwell 实验中穿透淋巴内皮细胞单层的数量是其他肺腺癌细胞系的 1.8 倍，这种淋巴亲和性与细胞高表达淋巴管内皮细胞黏附分子 Podoplanin 相关，黏附率达 60%，较正常肺泡上皮细胞高 40%。软琼脂克隆形成率达 35%，克隆形态呈腺泡状，边缘有细长突起，连续传代 50 次后，TTF-1 表达及淋巴转移能力无明显衰减，冻存复苏存活率超 85%。
在动物模型中，LA795 细胞的成瘤与转移模式ji具特点。接种 1×10⁶个细胞至 615 小鼠肺叶，7 天形成原位肿瘤，14 天沿支气管壁侵袭，21 天肺门淋巴结转移率达 80%（纵隔淋巴结转移率 65%），模拟人类肺腺癌的区域淋巴结转移优先模式。病理切片显示肿瘤组织破坏肺泡结构，形成腺样腔隙，免疫组化可见 TTF-1 阳性细胞沿肺泡间隔浸润，肺门淋巴结内可见与原发灶表型一致的转移灶。荧光标记追踪证实，细胞通过气道黏膜下淋巴管迁移至肺门淋巴结，分泌淋巴管生成因子 VEGF-C，使肿瘤周围淋巴管密度增加 2 倍，VEGF-C 抗体处理可使淋巴结转移率下降 60%。
发病机制研究揭示其du特的分子异常。基因测序显示，细胞存在 KRAS 基因第 12 密码子突变（G12D）和 EGFR 基因扩增，导致 RAS/RAF/MEK 通路与 PI3K/Akt 通路同时激活，Western blot 检测显示磷酸化 ERK（p-ERK）和磷酸化 Akt（p-Akt）水平分别是正常肺泡上皮细胞的 6 倍和 5 倍，双通路抑制剂联合处理可使细胞增殖率下降 75%，显著优于单通路抑制。与其他肺腺癌细胞系相比，其 E - 钙粘蛋白表达下调 40%，而 N - 钙粘蛋白表达上调 3 倍，这种上皮间质转化（EMT）特征使其更易脱离原发灶并侵入淋巴管。
转移机制方面，LA795 细胞的淋巴转移涉及多重调控。除 VEGF-C 介导的淋巴管生成外，细胞高表达趋化因子受体 CCR7，可响应淋巴结基质细胞分泌的 CCL21，迁移能力是 CCR7 阴性细胞的 2.3 倍，CCR7 拮抗剂处理可使肺门淋巴结转移灶数量减少 55%。基因芯片分析显示，转移灶细胞中与淋巴结定植相关的基因 ITGA4（整合素 α4）表达上调，该分子可与淋巴结内血管细胞黏附分子 - 1（VCAM-1）结合，促进肿瘤细胞在淋巴结内的存活与增殖，ITGA4 抗体处理可使转移灶体积缩小 60%。
在药物筛选应用中，LA795 细胞是评估肺腺癌靶向药物的有效模型。基于其 EGFR 扩增特性，对 EGFR 酪an酸激酶抑制剂（TKI）敏感，半数抑制浓度（IC50）约 0.6μM，药物处理后细胞 G1 期比例增加 40%，凋亡率上升 35%。体内实验显示，口服 EGFR-TKI 可使 615 小鼠肺原发瘤体积缩小 70%，肺门淋巴结转移率从 80% 降至 30%，疗效优于传统治疗方案。其淋巴转移特性使其成为抗转移药物的理想模型，某天然化合物可抑制其 VEGF-C 分泌，使淋巴管密度下降 50%，淋巴结转移率降低 45%。
在肿瘤微环境研究中，LA795 细胞与肺巨噬细胞的相互作用为解析转移机制提供了线索。共培养实验显示，巨噬细胞分泌的 IL-1β 可激活肿瘤细胞的 NF-κB 通路，使 MMP-9 表达上调 2 倍，侵袭能力增强 50%，IL-1β 中和抗体可阻断这种促进作用。在缺氧微环境（1% O₂）中，细胞 HIF-1α 表达上调，诱导多药耐药基因 ABCG2 表达，使药物敏感性下降 30%，HIF-1α 抑制剂可逆转这种耐药性。
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