NK-92MI细胞系
NK-92MI细胞系源于一位非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤（NK）细胞，经永生化处理后，成为肿瘤免疫研究领域的明星细胞模型。在显微镜下，NK-92MI 细胞呈圆形或椭圆形，以悬浮状态生长，细胞大小均一，表面可见丰富的微绒毛，这些结构极大地增加了细胞的表面积，有助于与靶细胞更高效地接触。细胞胞质丰富，经染色后呈弱嗜碱性，内部细胞器中，线粒体呈短棒状，为细胞高强度的杀伤活动提供充足能量；溶酶体数量众多且体积较大，内含穿孔素、颗粒酶等多种细胞毒性物质；高尔基体发达，参与合成和运输杀伤相关蛋白；细胞核大而圆，占据细胞大部分体积，染色质呈细颗粒状，核仁明显，显示出细胞活跃的代谢和增殖状态。
NK-92MI 细胞系的生物学特性围绕其强大的天然杀伤功能展开。细胞表面表达多种活化性受体，如 NKp30、NKp44、NKp46 和 NKG2D 等，这些受体能够识别靶细胞表面异常表达或上调的配体，如 MICA/B、ULBP 家族蛋白等，一旦结合，便触发细胞内的信号转导通路，激活磷脂酶 C-γ（PLC-γ），进而促使细胞内钙离子浓度升高，激活下游的蛋白激酶和转录因子，最终诱导溶酶体与细胞膜融合，释放穿孔素和颗粒酶，穿孔素在靶细胞膜上形成跨膜孔道，使颗粒酶能够进入靶细胞，激活半胱天冬酶级联反应，导致靶细胞凋亡。此外，NK-92MI 细胞还能通过分泌肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）和干扰素 -γ（IFN-γ）等细胞因子，一方面直接诱导靶细胞凋亡，另一方面调节机体免疫微环境，增强免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。值得注意的是，NK-92MI 细胞缺乏抑制性受体的功能性表达，这使其能够持续保持杀伤活性，不受正常细胞表面主要组织相容性复合体 I 类（MHC I）分子的抑制，成为理想的肿瘤杀伤细胞工具。
培养 NK-92MI 细胞系需要特定的条件和严格的操作规范。基础培养基通常选用含 12.5% 胎牛血清和 12.5% 马血清的 α-MEM 培养基，两种血清的搭配为细胞提供更丰富的营养成分和生长因子；同时添加 0.2 mM 肌醇、0.02 mM ye酸、1 mM 丙酮酸钠等补充剂，以及 1000 U/mL 的重组人bai细胞介素 - 2（rhIL-2），rhIL-2 是维持 NK-92MI 细胞存活、增殖和杀伤活性的关键细胞因子。将细胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒温培养箱中，模拟人体生理环境，维持细胞内酸碱平衡与酶活性。由于细胞呈悬浮生长，当细胞密度达到 0.2 - 1×10⁶个 /mL 时，需及时进行传代，传代时采用离心（1000 rpm，5 分钟）去除旧培养液，用新鲜预热的培养基重悬细胞，传代比例根据细胞状态控制在 1:2 - 1:5 。冻存时，采用 90% 胎牛血清与 10% 二甲基亚砜混合冻存液，遵循程序降温原则，先在 - 80℃冰箱过夜，再转入液氮中长期保存。在培养过程中，需定期通过台盼蓝染色检测细胞活力，利用流式细胞术检测细胞表面标志物如 CD56、CD16 的表达，确保细胞特性稳定。
在科研应用领域，NK-92MI 细胞系发挥着不可替代的作用。在肿瘤免yi治疗研究中，科研人员利用该细胞系开发基于 NK 细胞的过继性免疫疗法，通过基因编辑技术增强其对特定肿瘤抗原的识别能力，或与 CAR-T 细胞疗法相结合，拓展免yi治疗的应用范围；在一项针对多发性骨髓瘤的研究中，经改造的 NK-92MI 细胞显著提高了对肿瘤细胞的杀伤效率。在药物研发方面，NK-92MI 细胞是评估免疫调节药物和抗肿瘤药物疗效的重要模型，新型的 NK 细胞激活剂在该细胞系实验中，能够进一步增强其杀伤活性；同时，也用于研究药物对 NK 细胞功能的影响，为肿瘤联合治疗方案的设计提供依据。此外，NK-92MI 细胞还用于研究 NK 细胞的发育、分化和功能调控机制，为理解机体天然免疫防御系统提供理论支持。
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