INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞系
INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞系作为源自大鼠胰岛 β 细胞恶性转化的肿瘤模型,因保留葡萄糖依赖性胰岛素分泌功能,在糖尿病发病机制及胰岛 β 细胞功能研究中占据重要地位,成为探究 β 细胞增殖调控与代谢紊乱的关键实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠自发性胰岛细胞瘤,经原代培养和克隆化筛选建立。细胞形态以上皮样为主,呈多边形或短梭形,胞质丰富,可见细小分泌颗粒,约 15% 细胞形成胰岛样细胞团,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁清晰。生长方式为贴壁生长,部分细胞呈半悬浮状态,传代后 24 小时贴壁率达 88%。核心参数表现出胰岛 β 细胞特征:倍增时间约 72 小时,连续传代 50 次后染色体核型不稳定(染色体数约 44-46 条);β 细胞标志物胰岛素、谷an酸脱羧酶 65(GAD65)免疫荧光阳性率达 92%,胰高血糖素表达阴性;葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)功能显著,20mM 葡萄糖处理 2 小时后,胰岛素释放量是基础状态的 5.3 倍;无微生物污染,细胞纯度达 96%,保障实验结果可靠性。
科研应用价值:在糖尿病机制研究中,INS-1 细胞在高糖环境(30mM)培养 7 天后,胰岛素分泌量下降 42%,凋亡率升高 35%,β 细胞转录因子 PDX-1 表达量减少 58%,可模拟 2 型糖尿病中 β 细胞功能衰竭过程,为解析糖毒性损伤机制提供理想模型。药物筛选领域,该细胞对胰岛素增敏剂反应敏感,经二jia双胍处理后,GSIS 功能恢复 32%,AMPK 磷酸化水平升高 2.1 倍,适用于评估 β 细胞保护药物疗效。在 β 细胞增殖研究方面,细胞在 GLP-1 类似物刺激下,增殖活性提升 40%,Cyclin D1 表达量增加 3.7 倍,能很好地模拟体内 β 细胞再生过程,助力增殖调控机制探究。此外,将细胞与巨噬细胞共培养构建炎症模型,可研究慢性炎症对 β 细胞功能的影响。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基,添加 1mM 丙酮酸钠、50μM β- 巯基乙醇及 1% 抗生素,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度。培养基需每 48 小时更换,维持葡萄糖浓度在 11.1mM 以保持功能稳定。传代时采用 0.25% 胰dan白酶 + EDTA 消化 5 分钟,传代比例 1:2-1:3,每 5-6 天传代一次,避免细胞过度融合。冻存液配方为培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,程序降温后液氮保存,复苏存活率达 85%,3 代内可恢复 GSIS 功能。运输采用 T-25 培养瓶活细胞运输,收到后静置 24 小时换液,观察细胞团形态正常后开展实验。该细胞系仅限科研使用,操作需避免频繁换液影响分泌功能。
INS-1 大鼠胰岛细胞瘤细胞系以其du特的糖敏感性分泌功能与 β 细胞特性,在糖尿病研究与药物开发中不可替代,为揭示代谢性疾病的细胞机制提供了可靠的实验平台。
以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。