1/EJ 1-1大鼠纤维母细胞系
1/EJ 1-1大鼠纤维母细胞系作为源自大鼠正常结缔组织的成纤维细胞模型,因保留典型的纤维母细胞生物学特性及稳定的增殖分化能力,在创伤修复机制、组织纤维化病理及细胞外基质代谢研究中应用广泛,成为探究成纤维细胞功能及相关疾病机制的重要实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠皮下结缔组织,经原代培养和纯化获得。细胞形态呈典型长梭形,胞体细长,两端尖细,类似纺锤状,胞质均匀,可见细丝状结构,细胞核呈椭圆形,位于细胞中央,核仁清晰可见。生长方式为贴壁生长,呈平行排列或漩涡状分布,具有明显的接触抑制现象,传代后 24 小时贴壁率达 93%。核心参数表现出纤维母细胞特征:倍增时间约 50 小时,连续传代 25 次后仍保持稳定的生物学特性;表面标志物表达du特,波形蛋白(Vimentin)阳性率达 98%,α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在基础状态下阳性率低于 5%,结蛋白(Desmin)表达阴性;细胞外基质相关蛋白如 Ⅰ 型胶原蛋白、纤维连接蛋白分泌活跃,培养液中 Ⅰ 型胶原蛋白浓度达 120ng/mL;具有正常的二倍体核型(染色体数 42 条),无染色体异常;无微生物污染,细胞纯度达 96%,保障实验结果的可靠性。
科研应用价值:在创伤修复研究中,1/EJ 1-1 大鼠纤维母细胞展现出显著的迁移和增殖响应。经血小板衍生生长因子(PDGF)处理 24 小时后,细胞迁移距离增加 65%,增殖活性提升 40%,Ⅰ 型胶原蛋白 mRNA 表达量增加 2.3 倍,可模拟创伤部位成纤维细胞的活化过程,为解析创伤愈合机制提供理想模型。
组织纤维化研究方面,该细胞在转化生长因子 -β1(TGF-β1)刺激下,α-SMA 阳性率上升至 78%,呈现肌成纤维细胞表型,细胞外基质沉积量增加 3.2 倍,能很好地模拟纤维化过程中成纤维细胞的异常活化,助力肺纤维化、肝纤维化等疾病的病理机制研究。
药物筛选领域,该细胞对抗纤维化药物反应敏感,经特定药物处理后,TGF-β1 诱导的胶原蛋白合成量下降 45%,α-SMA 表达量降低 52%,适用于抗纤维化药物的活性评估。此外,通过构建该细胞与上皮细胞的共培养体系,可探究上皮 - 间质相互作用在组织修复中的调控机制,为创伤治疗提供新的研究思路。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,添加 1% 非必需氨基酸及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基需每 3 天更换一次,以保证细胞获得充足营养。传代时,当细胞融合度达到 80%-85% 时进行操作,用 PBS 冲洗细胞 2 次,加入适量细胞解离液(不含yi酶成分),37℃孵育 8-10 分钟,待细胞间隙增大后轻轻吹打使细胞脱落,传代比例为 1:3-1:4,每 4-5 天传代一次,避免细胞过度融合影响其正常功能。
冻存液采用培养基、胎牛血清和 DMSO 按 7:2:1 的比例配制,将细胞浓度调整为 1×10⁶-3×10⁶个 /ml,分装后经梯度降温盒降至 - 80℃,24 小时后转入液氮中保存。复苏时,将冻存管从液氮中取出,迅速放入 37℃水浴中解冻,离心后更换新鲜培养基,复苏后细胞存活率可达 88% 以上,2-3 代后即可恢复正常的生长和功能。运输采用干冰运输或培养瓶活细胞运输,收到细胞后需及时处理并观察细胞状态,确认细胞形态正常、无异常漂浮物后进行后续实验。该细胞系仅限科研使用,操作时需避免频繁振动培养瓶,以防细胞形态改变。
1/EJ 1-1 大鼠纤维母细胞系以其稳定的生物学特性、典型的纤维母细胞功能及易于培养的优势,在创伤修复与纤维化研究领域发挥着重要作用,为揭示相关疾病的发病机制和开发新型治疗药物提供了可靠的细胞模型。
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