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CHO/dhFr-中国仓鼠卵巢细胞系
产品型号:BY-1289
简要描述:

CHO/dhFr-中国仓鼠卵巢细胞系,上海乾思生物*的人胚肺成纤维细胞代理商,提供人胚肺成纤维细胞的报价,咨询。订购: 52271579订购

  • 厂家实力

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  • 质量保障

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详细介绍

CHO/dhFr-中国仓鼠卵巢细胞系
CHO/dhFr-中国仓鼠卵巢细胞系是基因工程与生物制药领域的里程碑式细胞模型,因缺失二氢ye酸还原酶(dhFr)而得名。作为野生型 CHO 细胞的衍生株,其du特的代谢缺陷与基因扩增能力,使其成为重组蛋白高表达的 “黄金宿主",在生物药研发与生产中占据核心地位。
一、细胞基本特性
  • 来源与形态:该细胞系源自中国仓鼠卵巢细胞(CHO),通过化学诱变筛选获得 dhFr 基因缺陷株。体外培养时呈上皮样形态,贴壁生长,细胞呈多边形或短梭形,排列均匀,边缘清晰。在 37℃、5% CO₂的培养环境中,增殖稳定,传代周期约 2-3 天,可适应贴壁培养或悬浮培养,尤其适合无血清培养基体系。

  • 遗传特征:保留 CHO 细胞的非整倍体核型(染色体数目约 20-22 条),核心特征是 dhFr 基因功能缺失 ——dhFr 是相关代谢关键酶,缺失后细胞无法自主合成胸苷和嘌呤,必须依赖培养基中的外源性次黄piao呤和胸苷才能存活(即 HT 营养缺陷型)。这一特性使其成为基因扩增的理想工具:当外源基因与 dhFr 基因共转染后,在特定抗代谢药物压力下,dhFr 基因会与外源基因共同扩增,从而显著提高目标蛋白的表达量。

二、核心应用领域
  1. 重组蛋白高表达平台

CHO/dhFr⁻细胞的核心价值在于其基因扩增能力。通过将外源基因(如抗体、细胞因子等)与 dhFr 基因串联导入细胞,可利用特定抗代谢药物进行阶梯式筛选:该药物会抑制残留 dhFr 活性,迫使细胞通过基因扩增增加 dhFr 拷贝数以抵抗药物压力,同时带动外源基因同步扩增(拷贝数可达数百甚至数千),最终实现目标蛋白的超高表达。这一机制使其成为单克隆抗体、重组人血清白蛋白等生物药的主流生产细胞系,表达量可高达 10-15g/L,远超普通细胞模型。
  1. 基因工程药物研发

在新药研发中,该细胞系用于构建稳定表达株,评估候选药物的理化性质与生物活性。例如,在单克隆抗体研发中,通过转染抗体轻重链基因,利用 dhFr / 特定抗代谢药物系统筛选高表达克隆,可快速获得具有临床潜力的细胞株。其优势在于:表达的重组蛋白可进行复杂的翻译后修饰(如糖基化、磷酸化),与人类蛋白修饰模式高度一致,保证药物的生物活性与安全性。
  1. 代谢工程与合成生物学研究

因其代谢缺陷明确,CHO/dhFr⁻细胞常被用于相关代谢通路研究,或通过基因编辑改造代谢网络,优化蛋白表达效率。例如,敲除细胞中的凋亡相关基因,可提高细胞在高密度培养中的存活率;过表达糖基转移酶,能优化重组蛋白的糖型,降低免疫原性。
三、优势与局限性
  • 优势:具有强大的基因扩增能力,可显著提高外源蛋白表达量;能对蛋白进行正确的翻译后修饰,产物活性接近天然蛋白;培养适应性强,可通过悬浮培养规模化生产,满足工业级需求;且无内源性病毒污染,生物安全性高,被 FDA 等监管机构广泛认可。

  • 局限性:基因扩增过程耗时较长(需数月阶梯式筛选),且特定抗代谢药物压力可能导致细胞基因组不稳定;部分复杂蛋白的表达仍受限于细胞自身的修饰能力(如某些特殊糖型无法合成);培养成本较高,需严格控制特定抗代谢药物浓度与培养基成分。

四、培养与注意事项
  • 培养条件:基础培养基需添加次黄piao呤和胸苷(HT 补充剂)以满足营养需求;若用于基因扩增,需在培养基中加入特定抗代谢药物(浓度从 0.01μM 逐步提升至 1μM 以上)。生产阶段可改用化学成分明确的无血清培养基,减少外源污染物,便于下游纯化。

  • 污染防控:贴壁细胞易受支原体污染,需定期通过 PCR 检测;冻存时使用含 10% DMSO 的冻存液,液氮保存可长期维持活性,复苏时快速解冻并离心去除 DMSO,避免细胞损伤。

五、研究意义

CHO/dhFr⁻细胞系的出现彻di改变了生物制药行业的格局:它解决了重组蛋白表达量低的瓶颈问题,推动了单克隆抗体等生物药从实验室走向临床。目前,全球 70% 以上的重组蛋白药物由该细胞系或其衍生株生产,包括治疗癌症的部分单抗药物、治疗类风湿关节炎的阿达木单抗等重磅药物。其技术原理也为其他细胞系的改造提供了范式,成为连接基因工程与产业化的关键桥梁,持续推动生物药向高效、安全、低成本方向发展。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。

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