PNTEC/HL-056猪正常胸腺上皮细胞系，上皮样贴壁生长，表达胸腺te有标志物，支持 T 细胞分化，对胸腺相关病毒敏感，适用于免疫发育、病毒免疫逃逸及免疫调节剂筛选。

胸腺特异性标志物与免疫分子：高表达胸腺上皮细胞特异性标志物，如细胞角蛋白 18（CK18，阳性率 98%）、胸腺xian素 β4（Tβ4，阳性率 96%），其 Tβ4 表达量是 SSC-S3 细胞的 15 倍；分泌胸腺sheng成素（thymopoietin）和白细胞介素 - 7（IL-7），其中 IL-7 含量达 35pg/10⁶细胞 / 天，能显著促进 T 细胞前体增殖（刺激指数达 3.8，SSC-S3 细胞仅 1.2），模拟胸腺皮质的 T 细胞发育微环境。

T 细胞分化支持功能：与猪骨髓来源的 T 细胞前体共培养时，可诱导 CD4⁺CD8⁺双阳性 T 细胞比例达 45%（SSC-S3 细胞共培养仅 8%），且能通过表达自身抗原肽 - MHC 复合物介导 T 细胞阳性选择，成熟 T 细胞的 TCR 多样性指数达 0.82（接近在体胸腺水平），证实其保留关键免疫教育功能。

病毒敏感性谱：对胸腺嗜性病毒（如 PCV2）的感染效率达 95%，感染后 48 小时出现典型细胞病变（细胞肿胀、脱落），病毒滴度达 10⁷.⁵ TCID₅₀/mL（是 SSC-S3 细胞的 8 倍）；因高表达 PCV2 受体硫酸乙酰肝素和整合素 αvβ3，对免疫抑制性病毒的吸附效率显著高于皮肤细胞系，尤其适合病毒致免疫缺陷机制研究。

T 细胞阳性选择模型：通过该细胞系发现猪胸腺上皮细胞表达的 Aire 蛋白可激活 300 余种自身抗原基因，其中胰岛素样生长因子 2（IGF2）的表达量与 CD4⁺单阳性 T 细胞比例呈正相关（R²=0.91），敲除 Aire 后成熟 T 细胞的自身耐受性显著下降（自身抗体产生率上升 60%），揭示胸腺中枢耐受的分子基础，研究结果与仔猪胸腺组织的基因表达谱一致性达 90%。

免疫缺陷病模拟：在该细胞系中沉默 IL-7 基因后，T 细胞前体增殖率下降 70%，CD4⁺CD8⁺双阳性细胞比例降至 12%，模拟先天性胸腺发育不全综合征的病理特征，其免疫指标与临床病例的吻合度达 85%，为免疫缺陷病的基因治疗提供靶点。

PCV2 致免疫抑制机制：利用其胸腺上皮特性，发现 PCV2 的 Cap 蛋白可与 Tβ4 结合（结合常数 KD=2.3×10⁻⁸M），抑制 IL-7 分泌（下降 55%），导致 T 细胞成熟障碍（CD4⁺T 细胞比例从 30% 降至 12%），与 PCV2 感染仔猪胸腺萎suo的病理变化高度一致（胸腺指数下降 40%），揭示病毒靶向胸腺的免疫逃逸策略。

病毒干扰抗原呈递研究：猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染该细胞系后，MHC-Ⅱ 类分子的细胞表面表达量下降 65%，其 N 蛋白可与 CIITA（MHC-Ⅱ 类分子转录激活因子）相互作用，抑制抗原呈递功能，T 细胞增殖反应下降 50%，解释了 PRRSV 的免疫抑制特性。

胸腺功能增强剂筛选：建立基于 T 细胞成熟效率的高通量筛选模型，发现某植物多糖可使该细胞系的 IL-7 分泌量提升 40%，CD4⁺CD8⁺双阳性 T 细胞比例增加 25%，饲喂仔猪后外周血 T 细胞多样性提升 18%，证实其免疫增强效果。

胸腺靶向疫苗效力评价：在 PCV2 疫苗研发中，该细胞系与 T 细胞共培养模型的中和抗体效价与仔猪攻毒保护率一致性达 93%（SSC-S3 模型仅 65%），被农业部列为免疫抑制性病毒疫苗的优选评价模型。

培养基：RPMI-1640 培养基添加 10% 胎牛血清、50μM β- 巯基乙醇，pH 维持在 7.2-7.4；为维持免疫功能，可添加 10ng/mL 表皮生长因子（EGF），使 Tβ4 表达量提升 30%。

传代流程：当细胞融合度达 75% 时，按 1:3 比例接种（低于 SSC-S3 的 1:4 比例），离心速度 1000rpm，24 小时贴壁率超 92%，避免过度融合（＞85% 会导致 IL-7 分泌下降）。

冻存保护：采用含 10% DMSO 的wan全培养基，细胞密度 2×10⁶个 /mL，程序降温至 - 80℃过夜后转入液氮，复苏时 37℃水浴 1 分钟，接种后 48 小时更换培养基，存活率可达 88%，需检测 CK18 表达确认表型稳定。

T 细胞共培养体系：将 5×10⁴个该细胞系与 1×10⁵个猪骨髓 T 细胞前体接种至 24 孔板，添加 10U/mL IL-2，培养 7 天后通过流式细胞术检测 CD4⁺CD8⁺细胞比例，结果变异系数＜7%。

病毒感染实验：接种 PCV2（MOI=0.1）后，37℃培养 48 小时，通过实时荧光定量 PCR 检测病毒 DNA 拷贝数（可达 10⁹ copies/mL），需设置 SSC-S3 对照组明确组织特异性差异。

优势：

局限性：